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3. Ergebnisse 77
Raivich et al., 1994). Mikrogliazellen, die auf einem konfluenten Astrozytenrasen ausgesät
werden, erscheinen zunächst klein und abgerundet (Sievers et al., 1994; Kloss et al., 1997),
und entwickeln innerhalb von 10 Tagen in Kokultur ein ramifiziertes Aussehen (Abb. 21,
oben links). Unter diesen Zellkulturbedingungen ist der Anteil der nicht-ramifizierten Zellen
verhältnismäßig niedrig, zwischen 4% und 8% aller aMβ2 positiven Mikroglia (Abb. 22A, C).
3.3.1.2. Effekt von Gehirnzellmembranen der Maus auf ramifizierte Mikroglia-
Kokulturen
Die Zugabe von Gehirnzellmembranen in der Kokultur für 48 Stunden, führte bei der
Mikroglia zu einem stufenweißen Verlust der ramifizierten Morphologie und der Anzahl an
ramifizierten Zellen in Abhängigkeit von der Menge der zugegebenen Membranen (Abb. 21,
22A). Die Zugabe von 2.22 µg/ml Proteinkonzentration von Gehirnzellmembranen führte zu
einem ersten starken Effekt auf die Morphologie, mit Verringerung der mikroglialen
Ramifizierung. Zahlreiche kleine gerundete Makrophagen wurden bei 6.67 µg/ml sichtbar,
deren Form bei 20 und 40 µg/ml überwog. Völlig ramifizierte Mikroglia waren bei diesen
Konzentration selten, wobei sich in hohem Grade frei bewegliche mikrogliale Zellen mit
einem großen Wachstumskegel insbesondere bei 20 mg/ml häufig finden ließen.
Um den zeitlichen Verlauf dieser Transformation festzustellen, wurden die Zellkulturen 1-72
Stunden nach Zugabe der Gehirnzellmembranen bei einer Proteinkonzentration von
20mg/ml fixiert. Unbehandelte Zellkulturen dienten als Kontrolle (Abb. 22C, 23, 0h).
Nach 3 Stunden verloren die meisten mikroglialen Zellen ihre distalen Zellausläufer, was zu
einem stangenförmigen Aussehen der Zellen führte, gefolgt von einem Anschwellen des
Zellekörpers nach 6-12 Stunden, sowie einer Umwandlung der meisten Zellen in kleine,
abgerundete Makrophagen nach 24-48 Stunden. Ein kleiner Anteil der Mikroglia, ungefähr