Thesis - Tumb1.biblio.tu-muenchen.de

Inhaltsverzeichnis
II
2.1.3.3 Quantifizierung lichtmikroskopischer Immunhistochemie 28
2.1.3.4 Messung der Regenerationsrate im Nervus facialis 29
2.1.3.5 Anfärbung von Granulozyten und Makrophagen im Nervus facialis 29
2.1.4 Fluoreszenz Immunhistochemie 30
2.1.4.1 lmmunfluoreszenz-Doppelmarkierungen 30
2.1.4.2 Doppelmarkierungen mit intrinsischem IgG 31
2.1.4.3 Digitalisierung der Fluoreszenz im konfokalen Laser-Scanning-Mikroskop 33
2.1.4.4 Zelltypspezifische Quantifizierung der Immunfluoreszenz-Doppelfärbungen 34
2.1.4.5 Autofluoreszenzextraktion im konfokalen Laser-Scanning-Mikroskop 36
2.1.5 Immunelektronenmikroskopie 37
2.1.5.1 Gewebsentnahme und -behandlung für Immunelektronenmikroskopie 37
2.1.5.2 Immunhistochemie für die Elektronenmikroskopie 38
2.1.6 Quantifizierung der Leukozyten im Nucleus facialis 39
2.1.7 Messung von neuronalem Überleben im Nucleus facialis 39
2.2 Mikroglia in Zellkultur 40
2.2.1 Anlage der Zellkulturen 41
2.2.1.1 Primäre Astrozytenkultur aus der Ratte 41
2.2.1.2 Primäre Mikrogliakultur aus der Maus 42
2.2.1.3 Ramifizierten Mikroglia in Kokultur 43
2.2.1.4 Präparation der Zellmembranen 43
2.2.1.5 Stimulation der Kokulturen mit Zellmembranen 44
2.2.1.6 Stimulation der Kokulturen mit pharmakologisch wirksamen Substanzen 45
2.2.2 Immunzytochemie 45
2.2.2.1 Immunzytochemie mit Diaminobenzidin (DAB) 45
2.2.2.2 Immunzytochemische Fluoreszenz-Doppelmarkierungen 46
2.2.3 Quantifizierung der Deramifikation der Mikroglia 47
2.3 Material 49
2.3.1 Antikörper, Seren, Immunoreagentien 49
2.3.2 Lösungen, Puffer 51
2.3.3 Kulturmedien und –zusätze 53
2.3.4 Chemikalien 54