G - RWTH Aachen University

Inhaltsverzeichnis III
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 Die Leber und ihre Funktion 1
1.2 Die partielle Hepatektomie als Modell zur Untersuchung der
Leberregeneration in Säugern 2
1.3 Der Zellzyklus 3
1.4 Die Funktion der E-Cycline für den Zellzyklus 5
1.5 Zielsetzung der Arbeit 10
2 MATERIAL UND METHODEN 11
2.1 Material 11
2.1.1 Bakterienstämme 11
2.1.2 Zelllinien 11
2.1.3 Kulturmedien, Puffer, Lösungen 11
2.1.4 Primer und Plasmide 12
2.1.5 Enzyme 16
2.1.6 Antikörper 17
2.1.7 Kits und Molekulargewichtsmarker 17
2.1.8 Chemikalien und Radioaktivität 17
2.1.9 Geräte 19
2.2 Methoden 21
2.2.1 Rekombinante DNA-Techniken 21
2.2.1.1 Konzentrationsbestimmung von Nukleinsäuren 21
2.2.1.2 Agarosegelelektrophorese 22
2.2.1.3 Transformation von E. coli-Bakterien 22
2.2.1.4 Anzucht transformierter E. coli-Bakterien 23
2.2.1.5 Isolierung von Plasmid-DNA aus E. coli-Bakterien 23
2.2.1.5.1 Plasmid Mini-Präparation 23
2.2.1.5.2 Plasmid Maxi-Präparation 24
2.2.1.6 Spaltung von DNA mit Restriktionsendonukleasen 24
2.2.1.7 Ligation von DNA-Fragmenten 24
2.2.1.7.1 TOPO ® -Ligation von DNA 24
2.2.1.7.2 Ligation von DNA mit dem Luziferasevektor 25
2.2.1.8 Extraktion von DNA-Fragmenten aus Agarosegelen 25