G - RWTH Aachen University

Material und Methoden 12
Medium für Agarplatten
1 Liter LB-Medium wurde mit 15 g Bacto-Agar versetzt und autoklaviert. Nach
Abkühlung auf unter 60°C wurde 2 ml Ampicillin-Lösung (100 mg/ml Ampicillin-
Natrium) zu dem Ansatz gegeben. Das Medium wurde in Petrischalen mit ei-
nem Durchmesser von 10 cm gegossen und nach dem Aushärten bis zur Ver-
wendung überkopf bei 4°C gelagert.
Einfriermedium für Hepatomzellen
Nach der Zentrifugation der trypsinierten Zellen wurde das Pellet in 5 ml Ein-
friermedium bestehend aus DMEM mit 20 % FCS und 10 % DMSO resuspen-
diert und die Zellen vor der Lagerung in flüssigem Stickstoff vorsichtig durch
Isopropanol bei -80°C abgekühlt.
2.1.4 Primer und Plasmide
Alle Primer wurden von der Firma MWG bezogen. Die Sequenz ist in 5’-3’-
Richtung angegeben. In der linken Spalte ist der Name bzw. die Bezeichnung
des Primers angegeben, während sich in der rechten Spalte die dazugehörige
Sequenz wiederfindet.
+91 CTC GAG TGC GGA GAG TCT GGC TGG TTA A
Gegenstrangprimer zur Amplifizierung des murinen Cyclin E2-
Promotors, bindet im kodierenden Bereich, XhoI-tail
-1708 GGT ACC AAG GCT CCC ACG TAC CTC GTC C
-1594 GGT ACC GTG TTT ACA TTC TGC GGC CG
-1502 GGT ACC TCC CCG TGC CTC TGA GGA GAC
-1444 GGT ACC CAA AAC GCG GAG CCG AAC CG
-1418 GGT ACC GAC ACT CCG AGA TCT AAG AG
-1369 GGT AAC AAG GCG TGC GGG AGC CTG T
-1329 GGT AAC AGG AGC CTC TGA GCC GTG CA
-1299 GGT AAC GCG CAG GTG AAG CGC CGA GA
-1259 GGT AAC CAG CCG TAC GGC CAC TCG
-1201 GGT AAC TGA GGG CAG GGC GCG
-1144 GGT AAC AAG GCG CCG GCC GAG GTG TCA
-1090 GGT ACC CCG GCC TAT ATA TTG AGT TG