Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck

5. Zusammenfassung 89
Mit zwölf rekombinanten Polypeptiden wurde untersucht, ob lineare Epitope relevante
Zielantigene darstellen und wo diese lokalisiert sind. Diese wurden in Anlehnung an ein
„PepScan“-Verfahren hergestellt. Fünf die N-terminale globuläre Domäne, drei die C-
terminale und zwei die Rod-Domäne darstellende Plasmide wurden hinsichtlich ihrer Größe
und Expressionsstärke optimiert und in Bakterienzellen exprimiert. Ihre Reaktivität wurde im
Westernblot-System mit den Seren von BP-Patienten überprüft. Mit dem reaktivsten
Polypeptid BP230-C3, einem 38 kD Protein der C-terminalen Domäne, konnten BP230-AAk
bei 32 von 49 (65%) Seren von BP-Patienten (Spezifität 98,9%) nachgewiesen werden.
Basierend auf BP230-C3 wurde ein ELISA zum Nachweis von anti-BP230-
Autoantikörpern entwickelt. Mit diesem konnten bei 31 der 49 Seren von Patienten mit BP
(63%) AAk gegen BP230-C3 nachgewiesen werden (Spezifität 97%), womit bereits der
Prototyp mit dem alternativen kommerziellen Testsystem konkurrieren konnte.
Die vorliegende Arbeit bildete den Ausgangspunkt für die Herstellung eines kommerziellen,
bereits CE gekennzeichneten ELISA als in vitro Diagnostikum. Es wird angestrebt, durch
die parallele Bestimmung von anti-BP230- und anti-BP180-Ak auf die Entnahme einer Haut-
Biopsie zukünftig verzichten zu können. Das entwickelte Biochip-Mosaik für den IFT stellt
ein nützliches Hilfsmittel für weitere Studien zur Erforschung der Epitopverteilung dar. Sollte
sich zeigen, dass Ak gegen BP230 doch pathogenetische Relevanz besäßen, so stünden die
entsprechenden Polypeptide für eine Kopplung an Antikörper-Absorptionssäulen zur
Verfügung.