Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck

4. Diskussion 77
Die Konstrukte wurden in Säugerzellen (HEK293) exprimiert, wodurch höchstwahrscheinlich
Sekundär- und Tertiärstrukturen ausgebildet und konformationelle Epitope dargestellt werden
konnten. Ferner waren posttranslationale Modifikationen wie Glykosylierungen und
Disulfidbrücken möglich. Durch die Wahl der Immunfluoreszenz als Testsystem entfiel eine
Aufreinigung der Proteine und damit die Notwenigkeit der Verwendung evtl. denaturierender
Reagenzien. Es konnte nicht ausgeschlossen werden, dass aufgrund des Fehlens der mit
BP230 interagierenden Proteine in der Haut die Konformation negativ beeinflusst wurde. Der
Nachweis von BP230 spezifischen Antikörpern wurde nur als valide angesehen, wenn auf
dem untransfizierten Kontrollsubstrat keine Antikörperbindung stattfand oder ein anderes
Fluoreszenzmuster nachgewiesen wurde.
4.2 Ermittlung der Grundgesamtheit von anti-BP230-Antikörpern
Für die Studie wurden ein Kollektiv aus 49 Seren von Patienten mit einem durch direkte
Immunfluoreszenz gesicherten BP, 11 Seren von Patientinnen mit Pemphigoid gestationis
(PG), 16 Seren mit Pemphigus vulgaris (PV) und 94 von gesunden Blutspendern verwendet.
Das PG tritt während oder kurz nach der Schwangerschaft auf und ist dadurch gekennzeichnet,
dass es nur selten zur Blasenbildung kommt und die Krankheit wieder vollständig verheilt
(Sitaru et al., 2004). Es könnte mit einer frühen Phase des BP verglichen werden.
Zusätzlich wurde ein Kollektiv aus 101 Seren von Patienten im Alter von über 70 Jahren mit
nicht-inflammatorischen Autoimmunkrankheiten der Haut auf anti-BP230-Antikörper
untersucht. Hasler et al. beschrieben 2005, dass sich das Immunsystem im Alter verändert,
was u. a. durch eine vermehrte Bildung von Autoantikörpern charakterisiert ist. Ob auch anti-
BP230-Antikörper darunter sind, und welche Bereiche sie auf dem Protein binden, sollte im
Rahmen dieser Arbeit untersucht werden.