Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck

4. Diskussion 74
Vorteil, dass der Nachweis der Proteine in einem in vivo ähnlichem Milieu erfolgt.
Andererseits können sich die Polypeptide auch durch den Zellaufschluss verändern oder
abgebaut werden. Ferner besteht die Möglichkeit, dass der Antikörper mit einem
Interaktionspartner des Zielproteins und nicht mit diesem selbst interagiert.
Im Rahmen dieser Arbeit wurde BP230 rekombinant in Säugerzellen hergestellt und im IFT,
der annähernd in vivo Bedingungen liefert, eingesetzt. Die Ergebnisse sollten Aufschluss über
die Prävalenz dieser Antikörper in BP-Seren geben. Zusätzlich wurde der diagnostische
Einsatz angestrebt, um die Analytik zu erleichtern und ein alternatives Substrat zur bislang
verwendeten Spalthaut zur Verfügung zu stellen.
Es gibt bisher keine Publikation, in der die rekombinante Expression des 308 kD BP230-Voll-
Längen-Proteins beschrieben ist. Kromminga et al., 2004 exprimierten ein entsprechendes
Konstrukt in Insektenzellen, konnten es allerdings nicht als Zielantigen für einen ELISA
verwenden, weil die Ausbeute an rekombinantem Zielprotein zu gering war.
4.1 Entwicklung von BP230-Biochip-Mosaiken
Eine Innovation der EUROIMMUN AG ist die Entwicklung der Biochip-Technologie zur
Standardisierung und Modernisierung der indirekten Immunfluoreszenz. Dazu werden z. B.
kultivierte Zellen auf chemisch aktivierte Deckgläser aufgebracht und auf der Oberfläche
fixiert. Anschließend werden die Deckgläser maschinell in millimetergroße Fragmente, die so
genannten Biochips, unterteilt. Dadurch lassen sich bis zu mehreren tausend Biochips aus
einen Deckglas (100 x 60 mm) gewinnen. Es können bis zu 15 unterschiedliche Chips in
einem Testfeld kombiniert werden. Auf einem Objektträger befinden sich 5 oder mehr
Biochip-Mosaike (Abbildung 41), die jeweils mit dem Probenmaterial eines Patienten in
einem Schritt inkubiert werden können. Die gewonnenen Ergebnisse sind zu 100%
vergleichbar.