Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck
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3. Ergebnisse 59<br />
dem monoklonalen anti-His-Antikörper nachweisen (Abbildung 30). Demnach handelte es<br />
sich hierbei nicht um das Zielprotein oder Teile von diesem.<br />
Abbildung 30: Nachweis von BP230-N2 mit einem monoklonalen anti-His-Antikörper im<br />
Westernblot. In den Ansätzen 1 bis 5 konnte eine Proteinbande von 52 kD angefärbt werden,<br />
aber keine von 17 kD.<br />
Alle Polypeptide wurden massenspektrometrisch analysiert (siehe 2.15.1.7). In den Proben,<br />
die die apparenten Massen aus Tabelle 7 besaßen, wurden die erwarteten Fragmente von<br />
BP230 identifiziert. Das BP230-N2-Präparat enthielt ein 17 kD Polypeptid, das als<br />
Chloramphenicol Acetyltransferase (CAT, Genbank<strong>zu</strong>griffsnummer Q194N7) aus E. coli<br />
identifiziert wurde. Dieses Protein wird durch das Rosetta-Plasmid in dem verwendeten<br />
Expressionsstamm E. coli RosettaBlue(DE3)pLacI kodiert und dient als Selektionsmarker.<br />
Das 34 kD Polypeptid im BP230-C1-Präparat wurde als BP230-C1 identifiziert und war