Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck
Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck
2. Material und Methoden 27 2.13.2.2 Für das eukaryotische System Die Strategie für die Herstellung der codierenden Sequenzabschnitte, die für die Expression im eukaryotische System vorgesehen waren, ist sind Abbildung 15 und 16 zusammengefasst. Abbildung 15: Strategie zur Herstellung der Expressionskonstrukte BP230gN, BP230gC, BP230gNC: Die Domänen von BP230 (rot), die verwendeten PCR-Vorlagen (grün), die verwendeten Oligonukleotide (EP = Euroimmun Primer) und die zu amplifizierenden Fragmente. Zur Herstellung von BP230-Voll-Länge wurde das Plasmid pTriEx-1-BP230gNC durch Restriktion mit BamHI und Eco52I linearisiert. Der für die Rod-Domäne kodierende Sequenzbereich wurde amplifiziert (Abbildung 16). Die Amplifikate wurden mit den entsprechenden Enzymen (siehe 2.13.3) restringiert und in den linearisierten Vektor pTriEx-1
2. Material und Methoden 28 (siehe 2.9) bzw. pTriEx-1-BP230gNC, der für die komplementären Schnittstellen kodierte, ligiert (siehe 2.13.5). Abbildung16: Herstellung des für die BP230-Voll-Länge kodierenden Expressionskonstrukts: Die Domänen von BP230 (rot), die verwendeten PCR-Vorlagen (grün), die verwendeten Oligonukleotide (EP = Euroimmun Primer) und die zu amplifizierenden Fragmente. Die Ligation erfolgte in pTriEx-1-BP230gNC (BamHI/Eco52I geschnitten). 2.13.3 DNA-Restriktionsanalyse Die Restriktionsananlyse erfolgt mit den an den entsprechenden Stellen angegebenen Restriktionsenzymen der Firma Fermentas nach Herstellerangaben.
- Seite 1 und 2: Aus der Klinik für Dermatologie, A
- Seite 3 und 4: Als Dissertation genehmigt von der
- Seite 5 und 6: Inhaltsverzeichnis II 2.13.8 Testex
- Seite 7 und 8: 1. Einleitung 4 1 Einleitung 1.1 Au
- Seite 9 und 10: 1. Einleitung 6 und besteht aus 15
- Seite 11 und 12: 1. Einleitung 8 Sequenzbereich von
- Seite 13 und 14: 1. Einleitung 10 Frankreich und Tun
- Seite 15 und 16: 1. Einleitung 12 (Jainta et al., 20
- Seite 17 und 18: 1. Einleitung 14 Freiburg) (Kobayas
- Seite 19 und 20: 2. Material und Methoden 16 2 Mater
- Seite 21 und 22: 2. Material und Methoden 18 2.5 Ser
- Seite 23 und 24: 2. Material und Methoden 20 2.10 Tr
- Seite 25 und 26: 2. Material und Methoden 22 Tabelle
- Seite 27 und 28: 2. Material und Methoden 24 2.13.2
- Seite 29: 2. Material und Methoden 26 Abbildu
- Seite 33 und 34: 2. Material und Methoden 30 2.13.7
- Seite 35 und 36: 2. Material und Methoden 32 2.15 Bi
- Seite 37 und 38: 2. Material und Methoden 34 2.15.1.
- Seite 39 und 40: 2. Material und Methoden 36 2.15.4
- Seite 41 und 42: 2. Material und Methoden 38 (12 Stu
- Seite 43 und 44: 3. Ergebnisse 40 3 Ergebnisse Zur M
- Seite 45 und 46: 3. Ergebnisse 42 Datenbasis zu scha
- Seite 47 und 48: 3. Ergebnisse 44 Abbildung 22: IIF-
- Seite 49 und 50: 3. Ergebnisse 46 27 der 49 Seren vo
- Seite 51 und 52: 3. Ergebnisse 48 Westernblot verwen
- Seite 53 und 54: 3. Ergebnisse 50 Abbildung 25: Für
- Seite 55 und 56: 3. Ergebnisse 52 Von den Kolonien,
- Seite 57 und 58: 3. Ergebnisse 54 3.3.4 DNA-Sequenzi
- Seite 59 und 60: 3. Ergebnisse 56 nachgewiesen werde
- Seite 61 und 62: 3. Ergebnisse 58 Die Reinheit der P
- Seite 63 und 64: 3. Ergebnisse 60 vermutlich durch e
- Seite 65 und 66: 3. Ergebnisse 62 Bildverarbeitungss
- Seite 67 und 68: 3. Ergebnisse 64 diskriminieren, de
- Seite 69 und 70: 3. Ergebnisse 66 3.5 ELISA mit BP23
- Seite 71 und 72: 3. Ergebnisse 68 12 von 101 Seren d
- Seite 73 und 74: 3. Ergebnisse 70 Trotzdem ein Wechs
- Seite 75 und 76: 4. Diskussion 72 4 Diskussion Das b
- Seite 77 und 78: 4. Diskussion 74 Vorteil, dass der
- Seite 79 und 80: 4. Diskussion 76 Es bot sich an, di
2. Material und Methoden 28<br />
(siehe 2.9) bzw. pTriEx-1-BP230gNC, der für die komplementären Schnittstellen kodierte,<br />
ligiert (siehe 2.13.5).<br />
Abbildung16: Herstellung des für die BP230-Voll-Länge kodierenden Expressionskonstrukts:<br />
Die Domänen von BP230 (rot), die verwendeten PCR-Vorlagen (grün), die verwendeten<br />
Oligonukleotide (EP = <strong>Euroimmun</strong> Primer) und die <strong>zu</strong> amplifizierenden Fragmente. Die<br />
Ligation erfolgte in pTriEx-1-BP230gNC (BamHI/Eco52I geschnitten).<br />
2.13.3 DNA-Restriktionsanalyse<br />
Die Restriktionsananlyse erfolgt mit den an den entsprechenden Stellen angegebenen<br />
Restriktionsenzymen der Firma Fermentas nach Herstellerangaben.
Change language