Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck
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2. Material und Methoden 27<br />
2.13.2.2 Für das eukaryotische System<br />
Die Strategie für die Herstellung der codierenden Sequenzabschnitte, die für die Expression<br />
im eukaryotische System vorgesehen waren, ist sind Abbildung 15 und 16 <strong>zu</strong>sammengefasst.<br />
Abbildung 15: Strategie <strong>zu</strong>r Herstellung der Expressionskonstrukte BP230gN, BP230gC,<br />
BP230gNC: Die Domänen von BP230 (rot), die verwendeten PCR-Vorlagen (grün), die<br />
verwendeten Oligonukleotide (EP = <strong>Euroimmun</strong> Primer) und die <strong>zu</strong> amplifizierenden<br />
Fragmente.<br />
Zur Herstellung von BP230-Voll-Länge wurde das Plasmid pTriEx-1-BP230gNC durch<br />
Restriktion mit BamHI und Eco52I linearisiert. Der für die Rod-Domäne kodierende<br />
Sequenzbereich wurde amplifiziert (Abbildung 16). Die Amplifikate wurden mit den<br />
entsprechenden Enzymen (siehe 2.13.3) restringiert und in den linearisierten Vektor pTriEx-1