Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG - Universität zu Lübeck

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2. Material und Methoden 25 Abbildung 12: Amplifikationsschema von BP230-N2a, -N2b, -N2c. Darstellung der verwendeten Oligonukleotide (EP = Euroimmun Primer) und Restriktionsschnittstellen. In Abbildung 13 und 14 sind die Amplifikationsschemata die zur Korrektur der Inserts der Plasmide pET24d-N-BP230-C[+23] und pET24d-N-BP230-C1[+23] dienten dargestellt. Abbildung 13: Amplifikationsschema eines Teilstücks des Inserts von pET24d-N-BP230- C[+23] (Insert in orange dargestellt) wurde über die Restriktionsenzyme XhoI und EcoRI geöffnet. Mithilfe der vier Oligonukleotide wurden die fehlenden Sequenzbereiche synthetisiert, durch Overlap-PCR zusammengesetzt und in den Vektor ligiert.
2. Material und Methoden 26 Abbildung 14: Amplifikationsschma zur Korrektur des Inserts von pET24d-N-BP230-C1[+23] unter Einsatz überlappender Oligonukleotide im 3’Bereich der zu amplifizierenden Nukleotidsequenz.
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