Identifizierung und Charakterisierung von neuen Genen für die ...

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Abbildung 57: Übersicht der Transfektionseffizienz von
> 80%, cDNA4-GFP in Neuro2a-Zellen mit Lipofectamin2000-Reagenz.
Die Effizienzen der anderen Zelltypen
waren auf vergleichbarem Niveau.
cDNA4-GFP in Neuro2a
cDNA12-GFP in Neuro2a
cDNA4-GFP in HeLa
cDNA12-GFP in HeLa
Abbildung 58: Transfektion von cDNA4 (oben) und
cDNA12 (unten) als GFP-Fusionskonstrukte in
HeLa-Zellen. Diese zeigen genauso wie bei
NIH3T3-Zellen Ausschluss von cDNA4 vom Zellkern.
Bei cDNA12 zeigt sich allerdings eher eine
Gleichverteilung statt einer besonderen Anreicherung
im Zellkern. Solche Lokalisationseffekte sind öfters
zelltypabhängig (Cao, Borden et al. 1997), weswegen
auch hier verschiedene Zelltypen getestet wurden.
24 h 48 h 72 h 96 h 148 h 196 h 220 h
24 h 48 h 72 h 96 h 148 h 196 h 220 h
Abbildung 59: Zeitreihe der Transfektion von cDNA4-GFP (obere Doppelreihe) und cDNA12-GFP (untere
Doppelreihe) in Neuro2a-Zellen. Jede Spalte entspricht von links nach rechts einem der folgenden Zeitpunkte: 24,
48, 72, 96, 148, 196, 220 h. Es ist zu erkennen, dass das Fusionsprotein von TRIM46 in der Proteinisoform von
cDNA4 zu allen Zeitpunkten vom Zellkern ausgeschlossen bleibt. Hingegen ist die Proteinisoform von cDNA12
zunächst eher gleichverteilt zwischen Zellkern und Zytoplasma, wobei sich ab 148 h eine deutliche Anreicherung im
Zellkern abzeichnet.