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Identifizierung und Charakterisierung von neuen Genen für die ...

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Haupt-Splicevariante 2 (enthält cDNA12 mit 5’- wie 3’- terminalen Ergänzungen):<br />

TGGAGAAAGAGGGGAGCCAAAGCCGGCGCGGTTGTCTGTACGCAGGCGTCGGGGCCAACGTGGACTTGCTTTACTTCTTCCTCTACGCGCCTTGGGT<br />

GCAGCGCCCTCTTGTGGCAAGGAGGAAATAATGCTTCTAAGAGCATTCTAGGCCACCGCCCTGCTTGGTCTCCAGCCTTCTGTAGCCAAGGCATCTG<br />

CTGTCTCTCTGGACAAGCTGCACTCATCTTTCAGTCATGATCCCATGGCCTAGAGTCACCTGTGCCTTCATTGCTATTCATGTCATCTCCCGTACAA<br />

CTTCCTCAGACCTCCCTGACCCACTATAATTGCCTCAACAACTCCCGAAGATATGTGCCACCCAAGATGTAGCACCGTCCACCTGGAGTTCTTCTTC<br />

TGAAACGAGCTTCGTGCTTTATGTGAGTAGTATGACCAGGAATCGATGCAAGCTTCTAATAGGAGGAATGGTTCCTACCTCAAATACCCTCCATGTT<br />

ACCCACCCCCTAGACCGCCTTTGGAGAACCACGTGGGAAGAACTATTTCCCACCCCCTACCTCGACGGACGCAGTTCGAAGCTAGTCCCTGGAGCAT<br />

GCGCAGTGACATCTCACCCTCCCCACCCCTCCCTTCACCCCACCCGGCTCCTGCATTAAGCCCCGGGTTCGCAGCAGCAGCCAGGATCGGGCACCCG<br />

GGGGCGGGCGGGCACAGTAGGGCCATGGCTGAGGGTGAGGATATGCAGACCTTCACTTCCATCATGGATGCACTAGTCCGCATCAGTACAAGCATGA<br />

AGAACATGGAGAAGGAACTGCTGTGCCCAGTGTGCCAAGAGATGTACAAGCAGCCACTAGTGCTGCCTTGTACCCACAACGTGTGCCAGGCCTGTGC<br />

CCGGGAGGTTTTGGGCCAGCAGGGGTACATAGGCCATGGTGGGGATCCGAGTTCGGAGCCCACTTCTCCTGCTTCCACCCCTTCTACCCGCAGCCCC<br />

CGCCTCTCTCGGAGAACTCTCCCCAAGCCAGATCGCTTGGACCGGCTCCTTAAGTCAGGCTTTGGGACATACCCTGGGCGGAAGCGTGGTGCCTTGC<br />

ACCCCCAGACGATCCTATTCCCGTGCCCAGCCTGCCAAGGCGATGTGGAGCTGGGGGAGAGGGGCCTTTCCGGGCTTTTCCGAAACCTGACCCTAGA<br />

GCGAGTGGTGGAGAGGTACCGCCAGAGTGTGAGTGTGGGAGGAGCCATCCTGTGCCAGTTGTGCAAGCCCCCACCACTAGAGGCCACCAAGGGCTGC<br />

ACAGAGTGTCGAGCTACCTTCTGTAACGAATGCTTCAAGCTCTTCCACCCCTGGGGCACTCAGAAGGCGCAGCATGAGCCCACGCTACCCACTCTTT<br />

CATTCCGCCCCAAGGGTCTGATGTGTCCAGACCACAAGGAAGAGGTGACCCACTACTGTAAGACATGTCAACGACTGGTGTGCCAACTCTGCAGAGT<br />

ACGGCGTACCCACAGTGGGCACAAGATCACACCAGTGCTCAGTGCCTACCAGGCCCTCAAGGATAAGCTAACAAAGAGCCTGGCATACATCTTGGGA<br />

AATCAGGACACTGTGCAGACCCAGATTTGTGAGCTGGAAGAGACCATCAGGCACACTGAGGTGAGTGGTCAGCAAGCAAAAGAGGAGGTGTCCCAGC<br />

TGGTTCGGGGACTAGGGGCTGTGCTGGAAGAGAAGCGGGCCTCACTGCTTCAGGCCATTGAAGAATGCCAGCAAGAGCGCTTATCCCGGCTCAGCGC<br />

CCAGATCCATGAACACCAGAGCCTGCTGGATGGCTCGGGTCTGGTGGGTTATGCGCAGGAAGTCCTTAAGGAAACAGACCAGCCTTGTTTTGTACAA<br />

GCAGCCAAACAGCTGCATAACAGGATTGCCCGAGCCACTGAGGCCCTCCAGACATTCCGGCCAGCTGCCAGCTCCTCCTTCCGCCACTGCCAGCTGG<br />

ATGTGGGGCGTGAGATGAAGCTGTTGACCGAGCTTAGCTTCCTGAGAGTGCCCGAGGCGCCCGTCATAGACACCCAACGCACCTTTGCCTATGATCA<br />

AATCTTCCTGTGCTGGCGGCTGCCCCCTCACTCACCACCTGCCTGGCATTACACCGTTGAGTTCCGGCGCACAGATGTCCCCGCCCAGCCAGGCCCT<br />

ACACGCTGGCAGCGCCGGGAAGAGGTGAGGGGCACCAGCGCCCTTCTTGAGAACCCCGACACGGGCTCTGTGTACGTGCTGCGTGTCCGTGGCTGCA<br />

ACAAGGCTGGCTACGGAGAGTACAGTGAAGATGTGCACCTGCACACACCCCCAGCCCCTGTCCTGCACTTCTTCCTTGATGGCCGCTGGGGTGCGAG<br />

CCGAGAGCGGCTAGCCATCAGCAAGGACCAGCGAGCGGTGCGGAGTATCCCAGGGCTTCCCTTGCTGCTGGCTGCTGAGCGGCTGCTCACGGGCTGC<br />

CACCTGAGTGTGGACGTGGTCTTGGGTGATGTGGCTGTGACCCAGGGCCGCAGCTACTGGGCCTGTGCGGTAGACCCTGCCTCCTACTTGGTCAAGG<br />

TGGGCGTCGGGCTGGAGAGCAAACTTCAGGAAAGCTTCCAGGGTGCCCCGGATGTGATCAGCCCCAGATACGACCCGGACAGTGGGCACGACAGCGG<br />

TGCCGAGGACGCTGCCGTGGAGGCGTTACCACCCTTTGCTTTCCTGACCATCGGCATGGGCAAGATCCTGCTGGGTTCCGGAGCGAGTTCCAATGCA<br />

GGGCTGACAGGGAGGGATGGCCCCACCGCCAGCTGCACAGTGCCCCTGCCACCCCGCCTAGGTATCTGTTTGGACTACGAGCGGGGGCGGGTCTCCT<br />

TCCTGGATGCCGTGTCCTTCCGTGGGCTGCTCGAGTGCCCCCTGGACTGCTCAGGGCCTGTGTGCCCTGCCTTCTGCTTCATTGGGGGTGGCGCTGT<br />

TCAGCTGCAGGAGCCCGTGGGCACCAAGCCTGAGAGGAAAGTCACCATTGGGGGCTTTGCCAAACTGGACTGAGCCGTTCAGGCCCCCTCTCAGACC<br />

TGAGTTCTGCTCCCCAAGTCTCTGGCATCGAGTTTGTTTTCCCAACAGCTTCTCTCCCAGACTTTCCCTAACCATGTGGCCCTGCCCCATACCTTGC<br />

CAGCGGTGTCTTCCCAGGGCTTCCCTTGACTAAGGGACTTTCCTCTGCTTCTCTCTGGATGTCCTTCATTCTCTGTGTTACCTGTTGGCCTAGGCCG<br />

CAGGCTCATCATGTCTCTGACCCAGGCCCCGCCCTTGGCATCATAACCAAGGCATAGAAAGCCCTGTTCCGTCCCTGGCCTGTGCTCCTGAGCCTTA<br />

CTGGGAGGGAGGGCACCTGGAACACTGGATATGACTAACAACTCTGCCCTTGCCTTGCCAAGCCCCCCTGCCCCACTAATGCTGACTGCAGCCTTGG<br />

CAGCCAGGCTTTGAGCCTCCCAGTGAGACAGAGGAGAACCTATCCTGTTTTATTTGGGTCCCTATACCCTCCAGCTGCATGTCCCTTCTGTCCCTCT<br />

TCTCCTCTTGCATGCTTTACCTATCCAGCACCCATGCCAACGTGCCAAGTCTCCCTTGGGAACTCAGTTAAGGCTGGTGTCCCCATTGGGTTGGGCC<br />

AAGCTAGGCCTCTGGTGCCTGCTACTGCCTCCGTACAGTGGGCATTGCTAGGCCTGTGCTGAGCAACAGCTGTAATTTTCATGGTTTATAAACAATA<br />

AACTGTGACACCAGGCAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA<br />

/translation="MQASNRRNGSYLKYPPCYPPPRPPLENHVGRTISHPLPRRTQFEASPWSMRSDISPSPPLPS<br />

PHPAPALSPGFAAAARIGHPGAGGHSRAMAEGEDMQTFTSIMDALVRISTSMKNMEKELLCPVCQEMYKQP<br />

LVLPCTHNVCQACAREVLGQQGYIGHGGDPSSEPTSPASTPSTRSPRLSRRTLPKPDRLDRLLKSGFGTYP<br />

GRKRGALHPQTILFPCPACQGDVELGERGLSGLFRNLTLERVVERYRQSVSVGGAILCQLCKPPPLEATKG<br />

CTECRATFCNECFKLFHPWGTQKAQHEPTLPTLSFRPKGLMCPDHKEEVTHYCKTCQRLVCQLCRVRRTHS<br />

GHKITPVLSAYQALKDKLTKSLAYILGNQDTVQTQICELEETIRHTEVSGQQAKEEVSQLVRGLGAVLEEK<br />

RASLLQAIEECQQERLSRLSAQIHEHQSLLDGSGLVGYAQEVLKETDQPCFVQAAKQLHNRIARATEALQT<br />

FRPAASSSFRHCQLDVGREMKLLTELSFLRVPEAPVIDTQRTFAYDQIFLCWRLPPHSPPAWHYTVEFRRT<br />

DVPAQPGPTRWQRREEVRGTSALLENPDTGSVYVLRVRGCNKAGYGEYSEDVHLHTPPAPVLHFFLDGRWG<br />

ASRERLAISKDQRAVRSIPGLPLLLAAERLLTGCHLSVDVVLGDVAVTQGRSYWACAVDPASYLVKVGVGL<br />

ESKLQESFQGAPDVISPRYDPDSGHDSGAEDAAVEALPPFAFLTIGMGKILLGSGASSNAGLTGRDGPTAS<br />

CTVPLPPRLGICLDYERGRVSFLDAVSFRGLLECPLDCSGPVCPAFCFIGGGAVQLQEPVGTKPERKVTIG<br />

GFAKLD*“<br />

849 AS-Reste.<br />

Zwar weisen <strong>die</strong> Proteine deutliche Größenunterschiede (537 versus 849 AS) auf, <strong>die</strong> Längen der<br />

mRNAs hingegen sind kaum verschieden. cDNA12 lässt sich durch den Einschub des 38 bp langen alternativen<br />

Exons 7b in cDNA4 überführen, was allerdings eine Verschiebung des Leserasters <strong>und</strong> ein vorzeitiges<br />

Stop-Codon bewirkt. Die etwas längere cNDA4 erzeugt dadurch das kürzere Protein. Ein<br />

Unterschied <strong>von</strong> 38 bp ist im Northern-Blot praktisch nicht auflösbar, so dass dort nur eine Bande<br />

erwartet würde (siehe Seite 52).

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