Identifizierung und Charakterisierung von neuen Genen für die ...
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Abbildung 149: Vektor pGEX-KG zur Herstellung <strong>von</strong> GST-<br />
Fusionskonstrukten, <strong>die</strong> in folgende MCS kloniert werden konnten<br />
(Leseraster zu GST sowie Xba I <strong>und</strong> Sal I Schnittstellen markiert):<br />
CTG.GTT.CCG.CGT.GGA.TCC.CCG.GGA.ATT.TCG.GTG.GT<br />
G.GTG.GTG.GGA.ATT.CTA.GAC.TCC.ATG.GGT.CGA.CTC.<br />
GAG.CTC.AAG.CTT.AAT.TCA<br />
Abbildung 148: Verwendete Marker <strong>für</strong><br />
Agarose-Gele mit verschiedenen DNA-<br />
Fragmentlängen.<br />
Abbildung 150: Der pKO Scrambler NTK<br />
Vektor <strong>von</strong> Stratagene (Katalog #745020-<br />
745027) lieferte <strong>für</strong> <strong>die</strong> Erstellung des<br />
Knock-out-Konstruktes wichtige Sequenzteile<br />
wie <strong>die</strong> Thymidin-Kinase, <strong>die</strong> aus ihm<br />
herauskloniert werden konnten.<br />
>Primer revers <strong>für</strong> RT-Reaktion zur Klonierung der cDNA <strong>von</strong> TRIM46 <strong>und</strong> Splicevarianten Tm 57°C<br />
ATATCCAGTGTTCCAGGTGCCC<br />
>Primer vorwärts mit Bam HI zur Klonierung der cDNA <strong>von</strong> TRIM46 <strong>und</strong> Splicevarianten Tm 57°C<br />
GGATCCATGGCTGAGGGTGAGGATATGC<br />
>Primer revers mit Not I zur Klonierung der cDNA <strong>von</strong> TRIM46 <strong>und</strong> Splicevarianten Tm 54°C<br />
GCGGCCGGTCAGAGACATGATGAGCCTGC