Identifizierung und Charakterisierung von neuen Genen für die ...

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Expressionsdaten der ISH reproduziert und verbessert werden, wobei die lacZ-Färbung mit x-gal
geringeren Hintergrund produzierte.
Während der Embryogenese fiel ab Stadium E9 zuerst die Expression in Blutgefäßen auf, wobei die
großen Arterien, nicht jedoch Venen betroffen waren. Im weiteren Verlauf der Entwicklung kamen immer
mehr sich neu bildende Arterien hinzu, so dass das Gen als spezifisch für wachsende Arterien angesehen
werden kann. In ausgewachsenen adulten Arterien hingegen verblasste die Blaufärbung nach und nach, so
dass eine Funktion während der Bildung angenommen werden sollte. Diese Annahme wird untermauert
durch die Beobachtung eines Wiederauftretens von TRIM46-Expression bzw. lacZ-Färbung in neu
wachsenden Arterien im Adulten, wie dies bei einem Tumor beobachtet wurde oder bei verletztem
Gewebe in der Lunge.
Die Spezifität für Arterien wurde durch Ko-Lokalisation mit arterienspezifischen Markergenen wie
VEGFR2 und Neuropilin-1 bestätigt, währenddessen Venen mit ihren Markergenen wie Neuropilin-2 kein
gemeinsames Vorkommen mit TRIM46 bzw. lacZ-Färbung zeigten.
Innerhalb der Arterien konnte die Expression auf die innerste dem Lumen anliegende Zellschicht der
Endothelzellen präzisiert werden, was einmal durch entsprechende hohe Vergrößerungen direkt sichtbar
wurde und andererseits wieder durch Ko-Lokalisation mit endothelzellspezifischen Markerproteinen wie
PECAM-1 gezeigt werden konnte. Hingegen zeigten Markergene für andere Zelltypen in Arterien,
insbesondere Perizyten (NG2, PDGFR-β) dieses nicht.
Die Spezifität für Endothelzellen blieb nicht auf Arterien beschränkt, sondern es zeigte sich TRIM46-
Expression auch in anderen Endothelien, der Darmmucosa, der Harnblase, den Bronchien in der Lunge
wie auch den Lungenbläschen, den Nierentubuli, dem Epithel des Plexus choroideus, der den Liquor
cerebrospinalis produziert und dem Innenohr.
Es wäre eine nahe liegende Frage, ob TRIM46 in allen diesen Endothelien eine bestimmte,
endothelspezifische Funktion ausübt oder für eine bestimmte allgemeine Eigenschaft und Gemeinsamkeit
von diesen Endothelien verantwortlich zeichnet. Dieser Frage wurde durch Vergleich der Morphologie der
Endothelien unter dem Mikroskop zwischen homozygoten TRIM46-KO und heterozygoten sowie
Wildtypen nachgegangen, wobei auch immer wieder die Expressionen verschiedener Markergene
betrachtet wurden. Dabei zeigte sich keine auffällig erkennbare Veränderung in der Anatomie dieser
Endothelien. Die Rolle von TRIM46, sofern sie nicht doch redundant sein sollte, dürfte folglich auf andere
Funktionen oder Eigenschaften statt der offensichtlichen Morphologie bezogen sein.
Die Expression im Gehirngewebe, also jenseits der Gehirnarterien, tritt erst ab Stadium E13 und E14 in
Erscheinung. Bezüglich des Cortex und seiner drei in unserem Cortex-Screen betrachteten Stadien ist
TRIM46 dann allerdings genauso wie Klon 103 ein Vertreter für eine eher intrinsische Determination
corticaler Identitäten. Im Cortex selber ist seine Expression auf die Schichten 5 und 6 beschränkt, also
nicht nur regionen-, sondern auch schichtenspezifisch. Die Hauptexpression liegt im Hippocampus und
dort im Gyrus dentatus und der Region CA2, aber auch in den beiden anderen Regionen CA1 und CA3.
Zudem findet sich nennenswerte Expression in der Amygdala und dem entorhinalen und piriformen
Cortex.
Hippocampus und Amygdala sind Bestandteile des Archicortex, einer evolutiv älteren Vorläuferstruktur,
die mit dem Cortex aber in intensiver Verbindung steht und diesem hinsichtlich bestimmter Funktionen
wie Gedächtnisausbildung sogar hierarchisch übergeordnet ist. Die Amygdala ist des Weiteren mit dem
limbischen System verbunden und sorgt für emotionale Einfärbung von Erinnerungen bzw. emotionale
Erinnerungen, wohingegen der Hippocampus die Eindrücke aus dem Cortex in Bezug auf deren räumlichzeitlichen
Zusammenhänge verarbeitet. So zeigen beispielsweise Taxifahrer in London, die den ganzen
Stadtplan auswendig lernen müssen, um eine Lizenz zu erhalten, eine Vergrößerung des
Hippocampusgewebes.
Der entorhinale Cortex stellt eine Übergangszone zwischen Archicortex und Neocortex dar. Der
entorhinale Cortex besitzt reziproke Projektionen mit allen primären und sekundären Rindenfeldern, die
engsten Beziehungen bestehen jedoch mit dem Hippocampus. Zudem ist er Teil des limbischen Systems.
Das System entorhinaler Cortex/Gyrus dentatus diente in vielen Experimenten als Modell zum Studium