Identifizierung und Charakterisierung von neuen Genen für die ...

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Klon 103 – Etv5
Das Gen Etv5, welches auch unter dem Namen ERM bekannt ist, wurde bisher intensiv in der Lunge
erforscht (Liu, Jiang et al. 2003), wo es in dieser Arbeit auch mittels ISH detektiert wurde. ERM ist
verwandt mit ER81 und PEA3, mit denen es die PEA3-Gruppe innerhalb der Ets-Familie von
Transkriptionsfaktoren bildet.
Die Expression im Gehirn ist bisher beschrieben für frühe
Entwicklungsstadien des Zebrafisch (Munchberg, Ober et al.
1999), wo es grob in Bereichen des Diencephalons (dc), Telencephalons
(tc), der Grenze zwischen Mittel- und Hinterhirn (mhb)
sowie der Epiphyse (ep) beschrieben wurde, wie im Bild zu sehen.
In der Maus gibt es Expressionsstudien mittels ISH vom Stadium E9,5 bis E15,5, wobei aber im Cortex
noch keine Details zu erkennen sind (Anne Chotteau-Lelièvre 1997) und die Veröffentlichungen sich
allgemein auf den Vergleich der drei Gene der PEA3-Gruppe und andere Organe konzentrieren, wie z.B.
die Hypophyse. Zudem werden die drei Gene ERM, ER81 und PEA3 dargestellt mit einer hohen
Homologie von 95% in der Ets-Domäne und 85% in der aminoterminalen Domäne, was die Frage nach
Redundanz aufstellt und hierzu insbesondere für die Planung einer Knock-out-Maus die Expressionen der
drei auf Überlappungen zu vergleichen wären.
Die in dieser Arbeit gemachten ISH geben im Vergleich zu den bisherigen Veröffentlichungen einen
weitaus detaillierteren Einblick in die Expression während der Cortex-Entwicklung insbesondere dem
Stadium E18,5 mit einer sowohl regionen- als auch schichtenspezifischen Expression. Hierbei ist
insbesondere der Zusammenhang der Expression im Cortex zwischen den Stadien E14 und E18,5
hervorzuheben, da bereits in E14 eine Expression sichtbar ist in derselben Region wie sie später in E18,5
noch stärker manifestiert ist. Dadurch ist das Gen ERM ein Vertreter derjenigen Gene, die für eine
bereits intrinsische Spezifizierung des Cortex noch vor dem Erreichen der thalamo-corticalen
Projektionen verantwortlich sind.
Für weitere Untersuchungen wäre eine Knock-out-Maus interessant, jedoch sollten vorher die
Überlappungsbereiche mit den beiden anderen verwandten Genen abgeklärt werden und aufgrund der
Expression in anderen Organen sowie in Frühphasen des Embryos generell eine Strategie des
konditionalen Knock-outs überlegt werden, sofern man sich gezielt auf die Funktion im Gehirn und
Cortex konzentrieren möchte.
Klon 133 – Gen Klf12 aka AP-2rep
AP-2rep ist ein Repressor des Transkritptionsfaktors AP-2 und bindet hierzu an ein cis-Element in dem
Promotor von AP-2α (Imhof, Schuierer et al. 1999). Bisher sind noch keine systematischen
Expressionsstudien über AP-2rep veröffentlicht, lediglich in frühen Stadien von Xenopus laevis ohne
Betrachtung des Gehirnes und Cortex (Gotoh, Izutsu et al.
2003). Demgegenüber sind die verschiedenen Subtypen von
AP-2 ausführlich untersucht. Von einem Repressor und
seinem Zielprotein würde man vielleicht eine komplementäre
Expression erwarten, da der Repressor die Transkription verhindern
könnte. Im Vergleich der veröffentlichten Expressionsdaten
von AP-2α (Shimada, Konishi et al. 1999) zu den
in dieser Arbeit durchgeführten ISH von AP-2rep zeigt sich
jedoch eher eine Überlappung (siehe Bild hier und auf Seite 47).
Dabei ist allerdings zu berücksichtigen, dass in der Veröffentlichung von Shimada die ISH von adultem
Mausgehirn gezeigt wurden, in dieser Arbeit aber die Expression während der Entwicklung zum Stadium
E18,5 betrachtet wurde. Denkbar wäre aber auch, dass die Regulation im Überlappungsgebiet dynamisch
aufgrund den Repressor aktivierenden Einflüssen erfolgt und nicht permanent stattfindet. In diese
Richtung könnten auch die Befunde einer neueren Veröffentlichung bewertet werden, die eine Senkung
der AP-2α-Konzentration nach 6 wöchiger Behandlung mit Lithiumchlorid (LiCl) beschreibt (Rao,
Rapoport et al. 2005). Lithiumchlorid wird auch beim Menschen zur psychiatrischen Medikation