Charakterisierung von pektinolytischen Enzymen der Zuckerrübe

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blasen gemacht, die die obere Lichtschranke auslösten, noch weit bevor der Flüssigkeitspegel
diese erreichte. So begann das Auslaufen der Kapillare noch bevor das definierte Volumen an
Reaktionsgemisch hochgepumpt wurde. Gebildet wurden diese Schaumbläschen von geringen
Resten des Reaktionsgemisches, die nach Bestimmung der ersten Auslaufzeit der Reaktions-
lösung, nicht vollständig aus dem stark verengten teil der Kapillare zurückliefen. Auch das
Erhöhen der Molarität der Reinigungslauge von 0,1 mol/l auf 1,0 mol/l und das Abnutschen
der Pektinlösungen über eine G2-Fritte konnten das Problem nicht lösen.
Bereits der Enzymextrakt neigte sehr stark dazu, einen über mehrere Tage stabilen Schaum
auszubilden, was entweder an Saponinresten gelegen haben könnte oder an Eiweißbestandteilen.
Dabei ist die Theorie, dass es sich dabei um Eiweißbestandteile handelt wahrscheinlicher,
da weder Meurer (1991) noch Ewest (2009) in ihren Arbeiten Ähnliches beschrieben. Trotz
dieser Vermutung wurde die Vierfachbestimmung der Durchlaufzeit einer Pektinlösung vorgenommen.
Dazu wurde die Kapillare frisch gereinigt und mit 15 ml Pektinlösung gefüllt. Die
Durchlaufzeit dieser Lösung wurde viermal nacheinander bestimmt. Dabei fiel auf, dass die
zweite bis vierte Durchlaufzeit gerade einmal in einem Bereich von 0,04 Sekunden variierte.
Die erste Durchlaufzeit hingegen lag ca. 0,2 Sekunden unter den anderen drei Durchlaufzeiten.
Wahrscheinlich waren Acetonreste, die nach dem Reinigen im stark verengten Teil der
Kapillare verblieben und mit bloßem Auge sichtbar waren, dafür verantwortlich. Auch Ewest
(2009) vermutete einen Einfluss dieser Rückstände auf die Durchlaufzeit. Der Versuch dieses
Problem über längere Trocknungszeiten zu lösen, brachte nicht den gewünschten Erfolg, da
zu viel Zeit nötig war, bis die Acetonreste verdunsteten. Der Versuch die Acetonreste über
das Durchleiten von Druckluft durch die Kapillare zu entfernen, war hingegen sehr erfolgreich,
da die Kapillare so schon nach 30 - 40 Sekunden völlig frei von Acetonresten war.
endo-
Polygalacturonaseaktivität in
E./g Zuckerrübe
0,14
0,12
0,1
0,08
0,06
0,04
0,02
0
2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 6,5 7 7,5
pH-Wert
Abb. 15: Entwicklung der endo-Polygalacturonaseaktivität bei verschieden pH-Werten