Charakterisierung von pektinolytischen Enzymen der Zuckerrübe

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Bei der Untersuchung des Enzymextraktes in Bezug auf die Aktivität der exo-Polygalac-
turonaseaktivität wurde das Verfahren nach Honda et al. (1982) eingesetzt. Bei diesem Ver-
fahren wird Galacturonsäure mittels 2-Cyanacetamid bei pH 9 umgesetzt und der Gehalt der
so entstehenden Substanz photometrisch bestimmt. Über eine Eichgerade kann dann der Ge-
halt an Galacturonsäure berechnet werden, der durch die Enzymaktivität freigesetzt wurde.
Unter Standardbedingungen konnte wie in Tabelle 5 dargestellt kaum eine Aktivität der exo-
Polygalacturonase nachgewiesen werden. Es ist recht wahrscheinlich, dass es sich bei der
nachgewiesenen Aktivität, die gegen Null tendiert, um die Aktivität der endo-Polygalac-
turonase handelt.
Tab. 5: Bestimmung der exo-Polygalacturonaseaktivität zweier Enzymextrakte unter
Standardbedingungen
units/g Zucker- in
Probe Extinktion ΔE units/ml rübe units/gZuckerrübe σ (±)
Extrakt 1 1 0,7025 0,0154 0,0001 0,0000
2 0,7086 0,0215 0,0002 0,0001
3 0,7002 0,0131 0,0001 0,0000
4 0,6969 0,0098 0,0000 0,0000 0,0000 2,8 x 10 -5
BE 0,5775
BS 0,2339
BP 0,1243
Bges 0,6871
Volumen Enzymextrakt in ml 46,5
Zuckerrübenmasse in g 100,0
Extrakt 2 1 0,4378 0,0343 0,0004 0,0002
2 0,4346 0,0311 0,0003 0,0001
3 0,4338 0,0303 0,0003 0,0001
4 0,4391 0,0356 0,0004 0,0002 0,0001 1,3 x 10 -5
BE 0,3195
BS 0,2120
BP 0,1280
Bges 0,4035
Volumen Enzymextrakt in ml 43,0
Zuckerrübeneinwaage in g 100,0
Als problematisch erwies sich bei diesem Versuch, dass sich das Substrat kaum lösen ließ. Es
handelte sich dabei eher um eine Suspension. Auch der Versuch, die Suspension auf 50 °C im
Ultraschallbad über längere Zeit zu erwärmen, zeigte keinen Erfolg. Die Versuche den pH-
Wert des Lösungsmittels zu erhöhen und zu senken, waren ebenfalls erfolglos. Die schlechte
Löslichkeit kann gegebenenfalls an der Herstellung des Natriumsalzes der Polygalacturonsäu-