Solubilisierung stark lipophiler Arzneistoffe in lipidhaltige ...

Kapitel III Experimenteller Teil
Organ auf. Des Weiteren zeigen die verwendeten Tiergewebe manchmal andere metabolische
Eigenschaften als beim Menschen, was v.a. beim erleichterten trägervermittelten
und metabolisch vermittelten Transport eine entscheidende Rolle spielen kann.
Deshalb ist ihre Anwendung als Modell in bestimmten Fällen auf die Gültigkeit für
Menschen zu prüfen.
Abb. 15 Schematische Darstellung der Ussing-Kammer-Vorrichtung
Da es sich bei der vorliegenden Arbeit um den Transport stark lipophiler Wirkstoffe
handelt, war eine Modifizierung der Methode erforderlich, so dass die verwendeten
Steroide in der Lösung der AK aufgenommen werden können. Für diesen Zweck wurde
die KRBP Lösung für die AK mit Zugabe von 4% BSA hergestellt. BSA ist zum einen
bekannt in zahlreichen Arbeiten für seine steroidbindende Eigenschaften [237-247]. Zum
anderen schafft seine Zugabe im Akzeptor benötigte in-vivo-ähnliche Sinkbedingungen
und verbessert somit die Aussagekraft der Permeabilitätsmessungen bei dieser Methode
[230,248,249].
Ein Teil der Experimente erfolgte durch Verwendung radioaktivmarkierten Testosterons
[³H]T, das zum Testosteron in der Probe gegeben und anschließend mittels Flüssigszintillationsmessungen
bestimmt wurde ( III.10). Für die anderen Untersuchungen
standen im Handel keine radioaktivmarkierten Testosteronester zur Verfügung und die
Synthese war zu kostenintensiv. Es war somit erforderlich, die Analytik für die
Testosteronester im BSA/KRBP Medium zu entwickeln und damit die Löslichkeit sowie
die Wiederfindungsrate der analytischen Methode zu bestimmen ( III.5.2).
Die Versuche der vorliegenden Arbeit wurden mit einer nach Grass und Sweetana [250]
modifizierten Technik (Dipl.-Ing. K. Mussler Scientific Instruments, Achen) durchgeführt
(Abb. 15). Die Versuchsapparatur ist mit sechs Plexiglaszellen versehen, die sechs
parallele Untersuchungen erlauben, wenn die Membranintegrität erhalten bleibt. Eine der
Zellhälften besitzt auf der Innenseite sechs Nadelspitzen. Die Kammeröffnung hat eine
Fläche von 0,7 cm 2 . Ein an ein Wasserbad angeschlossenes Durchflusssystem mit
Wärmeplatten sorgt für die notwendige Temperierung der Zellen. In einer Vorlaufphase
vor dem Einspannen der Gewebe wurde die Eigenpotenzialdifferenz (dPe) bzw. der
Eigenwiderstand (Rf) der spannungsmessenden Elektroden und der sich in der Kammer
befindlichen Flüssigkeit bestimmt. Die im Versuch ermittelten Daten wurden dann
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