Solubilisierung stark lipophiler Arzneistoffe in lipidhaltige ...

Kapitel III Experimenteller Teil
von seinen Estern zum Sättigen geschüttelt. Danach wurden die Proben filtriert (0,45 µm
Spritzenfilter) und je nach Bedarf mit reinem Plasma verdünnt. Anschließend wurden die
Proben nach der oben beschriebenen Methode A2 vorbereitet und nach der Methode
HPLC-2 gemessen. Es erfolgte dabei eine Dreifachbestimmung pro Probe. Die
Gleichungen der erhaltenen Bezugsgeraden nach der linearen Anpassung mit der
Methode der kleinsten Quadrate und die ermittelten Sättigungskonzentrationen sind in
Tabelle 10 zusammengefasst. Die Wiederholpräzision wurde durch Dreifachbestimmung
mit den aufgearbeiteten 20-µg/ml-Proben geprüft (Tabelle 11).
Tabelle 10 S.k.: Sättigungskonzentrationen der verschiedenen untersuchten Steroide im
Humanplasma. VB: Vertrauensbereich, n: Anzahl der Bestimmungen, NG und BG: nach
DIN 32 645 errechneter Nachweis- und Bestimmungsgrenzen, R²: Regressionskoeffizient,
ax+b: lineare Regressionsgleichung, S y : Reststandardabweichung der linearen Anpassung
S.k.±VB
[µg/ml]
n
NG
[µg/ml]
BG
[µg/ml]
R 2
ax+b Sy T 309,2 ± 4 3 0,35 1,14 0,9998 419,4x - 101,2 68,63
TP 273 ± 4,3 3 0,43 1,29 0,9997 364,2x - 68,8 74,4
TE 409,3 ± 12,9 3 0,89 2,78 0,9987 241,5x - 110,7 101,15
TU 35,5 ± 2,3 3 2,56 7,65 0,9949 189,8x - 22,3 161,46
EW TEs in Plasma 30 microgr./ml
NEP30_01 Diode Array
100
8.97
8.57 Plasmapeack
242
1.50e5
%
-1
1.24
Plasmapeak
1.51
T
2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00
Abb. 12 HPLC-Chromatogram von Testosteron und seinen Estern im Plasma
Tabelle 11 einfaktorieller ANOVA-Test für die Überprüfung
der Wiederholpräzision der Aufarbeitungsmethode
A2 mit Plasmaproben anhand der ermittelten
Peakflächen für fünf Wiederholungen/Probe,
Dreifachbestimmung u. Signifikanzniveau α= 0,05
TP
9.92
10.29
TE
11.22
12.12
TU
13.37
Time
Wirkstoff MW(MW) SA
ANOVA
rSA(%)
(MW) P-Wert
T 8239 4,4 0,05 0,909
TP 7227 20,6 0,29 0,991
TE 4724 20,1 0,43 0,956
TU 3783 16,3 0,43 0,997
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