Solubilisierung stark lipophiler Arzneistoffe in lipidhaltige ...

Kapitel III Experimenteller Teil
III.2 Herstellung mizellarer und mischmizellarer Systeme
Die Gallensäuren kommen im Dünndarm in Form der Na + -Salze vor. Ihre Konzentration
beträgt im Duodenum und oberen Jejunum durchschnittlich 5 mM (Bereich: 0-14 mM)
unter Fastenbedingungen und steigt bis zu ca. 10-15 mM (Bereich: 3-35 mM) nach dem
Essen an [223-226]. Basierend auf diesen Werten wurde für alle hergestellten mizellaren
Systeme in dieser Arbeit eine Tensidkonzentration von 20 mM ausgewählt.
Methode 1 (M1): Sojalecithinhaltige Systeme wurden nach der Kopräzipitationsmethode
[8] folgendermaßen hergestellt: Die entsprechenden Mengen von Tensid und dem
Sojalecithin (SL) (ggfs. auch vom Steroid) werden in einer Mischung aus CHCl 3:MeOH
(1:1) in einem mit Schliffhals versehenen Rundkolben gelöst. Das Lösungsmittel wird
mittels eines Rotationsverdampfers (angeschlossen an eine Vakuumpumpe und
versehen mit einem auf 40 °C temperierten Wasserbad bei etwa 200 mbar und 150
U/min) vollständig abgedampft. Dadurch entsteht ein Film an der inneren Wand des
Kolbens. Dieser wird in der Pufferlösung SPB (Untersuchungen zur Mizellbildung) oder
KRBP (Ussing-Kammer-Untersuchungen) im Ultraschalbad bei 40 °C gelöst, bis die
Lösung ganz klar wird (etwa 15 min.). Dabei wird der Kolben mit einem Glasstopfen
dicht verschlossen, um Verdunstung zu vermeiden. Nach Abkühlung auf Raumtemperatur
wird die klare mizellare Lösung durch 0,45 µm Membranfilter (Rotalibo®,
Nylon, Carl Roth GmbH & Co. Karlsruhe, Deutschland) filtriert.
Methode 2 (M2): Fettsäurehaltige MMS oder einfache lipidfreie Systeme wurden nach
der Dispersionsmethode [8] hergestellt: Zunächst werden die entsprechenden Mengen
von Tensid in der Pufferlösung gelöst. Die festen Bestandteile, wie z.B. Wirkstoffe oder
SS, werden mit den anderen flüssigen Bestandteilen wie OS benetzt bzw. gemischt und
dann bei 55 °C im Ultraschallwasserbad in der Tensidlösung dispergiert, bis zum Erhalt
einer klaren Lösung (ca. 45 min). Nach Abkühlung auf Raumtemperatur wird die klare
mizellare Lösung durch 0,45 µm Spritzenmembranfilter filtriert.
Variante 1 (V1): Sollten die mit ungesättigten Bestandteilen hergestellten Lösungen für
gewisse Zeit gelagert und nicht sofort verwendet werden (wie z.B. bei den Sättigungskonzentrationsbestimmungen),
mussten sie nach der Filtration in Ampullen oder in dicht
verschließbare lichtdichte Vials abgefüllt werden. Die Gefäße wurden vor dem Verschluss
mit Helium oder Argon als Schutzgas befüllt, um den Sauerstoff zu verdrängen.
Variante 2 (V2): Nach V1 hergestellte Lösungen ließen sich im Kühlschrank
monatelang stabil lagern, wenn sie mit 1%(W/V)-benzylalkoholhaltigem Puffer hergestellt
wurden. Bei Systemen, die nach M2 hergestellt wurden, wurde die benötigte Menge an
Benzylalkohol (BzOH) (flüssig) in einem Maßkolben mit den festen Bestandteilen
gemischt. Nach der Dispersion im Ultraschallbad wurde die Mischung mit Puffer auf das
Endvolumen aufgefüllt.
Die nach den o.g. Methoden hergestellten MMS müssen optisch klar sein (Transmission
≈ 99% bei 660 nm gegen reinen bzw. tensidfreien Puffer als Blindwert).
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