Solubilisierung stark lipophiler Arzneistoffe in lipidhaltige ...

Kapitel III Experimenteller Teil
Verwendete Puffer:
1- Phosphatpuffer nach Sörensen (SPB) (pH= 7,4; M≈0,067) [221]:
Für die Herstellung von 1 l Puffer werden 1,651 g KH 2PO 4 und 9,706 g Na 2HPO 4 in etwa
900 ml destilliertem Wasser in einem 1L-Maßkolben im Ultraschalbad bei Raumtemperatur
gelöst. Der pH-Wert wird ggfs. mit Natronlauge oder Salzsäure (0,1 N)
korrigiert. Anschließend wird die Lösung auf einen Liter aufgefüllt und durchmischt.
2 – Krebs-Ringer-Bicarbonatpuffer (KRBP) nach Saarbrücker Rezeptur (pH=7,4)
[222]:
Substanz Summenformel MG mM/l mg/l
Kochsalz NaCl 58,44 116,4 6802
Glucose C 6H 12O 6.H 2O 198,18 5,55 1100
Kaliumchlorid KCl 74,56 5,4 403
HEPES C 8H 18N 2O 4S 238,31 1 238
Natriumbicarbonat (Natron) NaHCO 3 84,01 2 168
Magnesiumchlorid MgCl 2.6H 2O 203,3 0,81 165
Natriumdihydrogenphosphat NaH 2PO 4.H 2O 137,99 0,78 108
Calciumchlorid CaCl 2.H 2O 147,02 1,8 265
Indomethacin*
C 19H 16ClNO 4 357,8 1,4.10 -3 ≈ 5
3 – Isotonischer Saline-Phosphatpuffer (PB) (pH=6; M≈0,154):
Dieser Puffer setzt sich aus 0,72 g K 2HPO 4, 4,88 g KH 2PO 4 und 6,59 g NaCl zusammen.
Die Substanzen werden in etwa 900 ml destilliertem Wasser in einem 1L-Maßkolben im
Ultraschallbad bei Raumtemperatur gelöst. Der pH-Wert wird ggfs. mit Natronlauge oder
Salzsäure (0,1 N) korrigiert. Anschließend wird die Lösung auf ein Liter aufgefüllt und
durchmischt.
4 – Igepal-Lysis-Puffer (ILP):
Tris 500,– mM 6,06 g/l
NaCL 140,– mM 8,18 g/l
MgSO 4 .7H 2O 1,5 mM 0,4 g/l
Igepal Ca-630 0,5% (V/V) 5,– ml
pH=8,0, mit HCL einstellen
* Indomethacin gehört nicht zur originalen Rezeptur des Puffers. Es dient aber zur Linderung des
Gewebestresses, der durch die Isolierung des Gewebes verursacht wird. Experimentell führte seine
Verwendung bei den Ussing-Kammer-Untersuchungen zum Erhalt von stabileren Kurven des
transepithelialen elektrischen Widerstands (Rt) während des Versuchs.
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