ABSTRACTS

34. Jahrestagung der Deutschen Plastischen Chirurgen
8. Jahrestagung der Deutschen Ästhetisch-Plastischen Chirurgen
P15 Platelet kinetics in the microcirculation of muscle flaps
after ischemia/reperfusion-a novel mouse model
S. Langer, C. Kim, M. Tränkle, O. Goertz, M. Koller, H.U. Steinau, H.H. Homann
Dept. of Plastic and Hand Surgery, Burn Center, BG Trauma Center, Ruhr University Bochum
Growing evidence supports the substantial pathophysiological impact of
platelets on the development of ischemia/reperfusion injury (i/r) in flaps
and replanted body parts. Methods for studying these cellular mechanisms
in vivo are not present yet. The aim of this study was to develop a
model enabling the quantitative analysis of platelet kinetics and plateletendothelium
interaction within consecutive segments of the microcirculation
of muscle flaps in vivo.
Materials and Methods: Female mice (balb/c; two groups, each n=8) were
anesthetized, a muscle flap was prepared and placed onto an observation
platform. Autologous platelets were separated from a blood donor animal
(n=8) and labelled ex vivo by means of r6G. After ischemia (90 min clamping)
and reperfusion (10 min) the labelled platelets were given i.v.
Microhemodynamics and kinetics of platelets were investigated by intravital
fluorescent microscopy. Velocities of red blood cells (RBCV) and platelets
were measured and the number of platelets rolling and adhering to
the microvascular endothelium was counted.
Results: The novel model allows direct visualization and analysis of platelet
dynamics in the microcirculation of flaps in vivo. As expected, i/r of
muscle flaps induced disturbances of the microcirculation (RBCV). Platelets
adhering to the inner vessel wall of venules increased in the ischemia
group (8(0,7, vs 0 control; mean/sem). Rolling platelets were only
found after ischemia (14,7(1,5 vs 0).
In conclusion, using intravital fluorescent microscopy platelet kinetics
were directly analyzed in the flap microcirculation in vivo for the first
time. Since platelet/endothelium interaction is key in the pathophysiology
of a failing flap this model will help to understand basic molecular
principles of i/r. Therapeutic strategies to protect flaps from i/r will soon
be evaluated using this model.
P16 Die Induktion von Hämoxygenase-1 inhibiert die
mikrovaskuläre Thrombusformation in vivo
N. Lindenblatt1,2 , R. Bordel1 , W. Schareck2 , M.D. Menger3 , B. Vollmar1 1 2 Abteilung für Experimentelle Chirurgie, Abteilung für Allgemeinchirurgie, Universität Rostock,
3Institut für Klinisch-Experimentelle Chirurgie, Universität des Saarlandes, Homburg/Saar
Der postischämische Reperfusionsschaden nach freiem Gewebetransfer
beruht wesentlich auf einer Bildung reaktiver Sauerstoffverbindungen,
welche zu einer erhöhten Thrombogenität im mikrovaskulären Gefäßsystem
führen. Der Einsatz antioxidativer Substanzen könnte somit zur
Verminderung des Gewebeschadens nach freien Lappenplastiken beitragen.
Das Enzym Hämoxygenase (HO) katalysiert den letzten Schritt des
Abbaus von Häm mit Freisetzung äquimolarer Mengen an Eisen, antioxidativem
Biliverdin und vasodilativem Kohlenmonoxid (CO). Die
nicht-konstitutive Isoform (HO-1) wird u.a. durch oxidativen Stress und
inflammatorische Stimuli im Sinne einer Gegenregulation zur Gewebeprotektion
induziert. Ziel der hier vorliegenden Studie war zu klären,
inwieweit die Expression von HO-1 die Bildung mikrovaskulärer Thromben
moduliert und damit die Athrombogenität des Endothels erhöht werden
kann.
Im Modell der Kremastermuskelpräparation der Maus wurde die Kinetik
der Bildung von, durch Superfusion mit FeCl3 induzierten, mikrovaskulären
Thromben mittels intravitaler Fluoreszenzmikroskopie
quantitativ analysiert. Nach Vorbehandlung mit Hämin (50 µM/kg ip, -
18hr) konnte im Kremastermuskel mittels Western Blot Analyse eine
Plastische Chirurgie 3 (Suppl. 1): 57 (2003)
Abstracts
deutliche Induktion von HO-1 Protein nachgewiesen werden. Parallel
dazu zeigten immunhistochemische Untersuchungen des Muskelgewebes
eine präferentielle Expression von HO-1 im Endothel und den glatten
Muskelzellen der Gefäße. Bei diesen Tieren war die Bildung arteriolärer
und venulärer Thromben (komplette Stase: 670±96s bzw.
647±129) signifikant (p