Umgang mit Kolbenhubpipetten
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Labor für Umweltanalytik und Ö kotoxikologie<br />
Prof. Dr. Harald Platen - FH Gießen Friedberg<br />
Allgemeines labortechnisches Verfahren (ALV 001)<br />
<strong>Umgang</strong> <strong>mit</strong> <strong>Kolbenhubpipetten</strong><br />
1 Vorbemerkung: Sicherheitshinweise<br />
1 Pipettieren immer unter Verwendung von Schutzbrillen!<br />
Dokument erstellt am 21.03.1997 von Anna Wirtz und Prof. Dr. Harald Platen<br />
Überarbeitungsnummer (Ü-Nr.): 4 vom 18.09.2000 von Prof. Dr. Harald Platen<br />
C:\Arbeitsbereich_HP\3503_ALV_Aktuell\ALV_001.doc<br />
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2 Bei besonders aggressiven oder giftigen Substanzen ggf. Handschuhe<br />
verwenden!<br />
2 Arbeitsvorschrift: Prüfen der Grundeinstellung<br />
1 Die Pipette bei allen Arbeitsschritten so halten, daß die Spitze nach<br />
unten zeigt<br />
2 Pipettenspitze an die Pipette ansetzen (gelbe Spitzen: 5 ... 200 µL;<br />
blaue Spitzen: 100 ... 1000 µL); Dabei diese nur am oberen, geriffelten<br />
Rand anfassen, nie an der Spitze!<br />
3 Bei einstellbaren Pipetten: kontrollieren, ob das gewünschte Volumen<br />
eingestellt ist!<br />
4 Prüfen der Druckpunkte:<br />
1. Pipettenknopf drücken bis zum ersten Druckpunkt; kurz halten<br />
2. Pipettenknopf drücken bis zum zweiten Druckpunkt; kurz halten<br />
3. Pipettenknopf langsam wieder zurückführen; nie abrupt loslassen!<br />
3 Arbeitsvorschrift: Pipettiervorgang<br />
1 Die Pipette bei allen Arbeitsschritten so halten, daß die Spitze nach<br />
unten zeigt<br />
2 Mit automatischen Pipetten lassen sich zuverlässig nur Lösungen pipettieren,<br />
die einen geringen Dampfdruck haben und die nicht zu viskos<br />
sind! Hoher Dampfdruck (z.B., bei Aceton) drückt die flüssigen<br />
Stoffe wieder heraus und macht eine exakte Volumeneinstellung<br />
Dokument-Nr:<br />
ALV 001
nicht möglich!<br />
Labor für Umweltanalytik und Ö kotoxikologie<br />
Prof. Dr. Harald Platen - FH Gießen Friedberg<br />
Allgemeines labortechnisches Verfahren (ALV 001)<br />
<strong>Umgang</strong> <strong>mit</strong> <strong>Kolbenhubpipetten</strong><br />
Dokument erstellt am 21.03.1997 von Anna Wirtz und Prof. Dr. Harald Platen<br />
Überarbeitungsnummer (Ü-Nr.): 4 vom 18.09.2000 von Prof. Dr. Harald Platen<br />
C:\Arbeitsbereich_HP\3503_ALV_Aktuell\ALV_001.doc<br />
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3 Bei den nachfolgenden Arbeitsgängen die Vorgänge an der Pipettenspitze<br />
ständig (vom Aufsaugen bis nach dem Entleeren) visuell<br />
kontrollieren, da<strong>mit</strong> Ungewöhnliches auffällt (z.B. Luftblasenziehen,<br />
etc.); nie "blind" arbeiten!<br />
4 Achtung: niemals aus Vorratsflaschen heraus pipiettieren! Immer ein<br />
Aliquot in ein Becherglas überführen und aus diesem heraus pipettieren!o<br />
In das Becherglas nur soviel eingießen, wie wahrscheinlich<br />
verbraucht wird! Der Rest wird nicht mehr in die Vorratsflasche zurückgegeben,<br />
sondern am Ende eines Arbeitstages verworfen!<br />
5 Pipettenspitze etwa ½ cm in die Flüssigkeit tauchen<br />
6 Den Pipettenknopf langsam bis zum ersten Druckpunkt drücken und<br />
kurz innehalten: wenn jetzt die Flüssigkeit ständig in die Spitzte<br />
strömt, ist diese nicht ducht aufgesetzt!<br />
7 Den Pipettenknopf langsam wieder zurückführen und darauf achten,<br />
daß keine Luftblasen <strong>mit</strong>gerissen werden<br />
8 Es gibt zwei Möglichkeiten nun die Pipettenfüllung in das gewünschte<br />
Gefäß zu überführen:<br />
1. Ablage des Inhalts an der Gefäßwandung: Dabei bei leicht schräg<br />
gehaltener Gefäßwand und senkrecht gehaltener Pipette die Spitze<br />
an der Wandung aufsetzen, den Pipettenknopf langsam bis zum<br />
ersten Druckpunkt drücken und beobachten, ob der ganze Spitzeninhalt<br />
herausgedrückt wird. Den Rest durch Drücken bis an den<br />
zweiten Druckpunkt herausbringen. - Pipettenspitze langsam von<br />
der Glaswand entfernen, prüfen ob keine Reste in oder an der Spitze<br />
verblieben sind und Druckknopf langsam wieder loslassen.<br />
2. oder<br />
Die Pipettenspitze 1 - 2 mm in die Flüssigkeit eintauchen und In-<br />
Dokument-Nr:<br />
ALV 001
Labor für Umweltanalytik und Ö kotoxikologie<br />
Prof. Dr. Harald Platen - FH Gießen Friedberg<br />
Allgemeines labortechnisches Verfahren (ALV 001)<br />
<strong>Umgang</strong> <strong>mit</strong> <strong>Kolbenhubpipetten</strong><br />
Dokument erstellt am 21.03.1997 von Anna Wirtz und Prof. Dr. Harald Platen<br />
Überarbeitungsnummer (Ü-Nr.): 4 vom 18.09.2000 von Prof. Dr. Harald Platen<br />
C:\Arbeitsbereich_HP\3503_ALV_Aktuell\ALV_001.doc<br />
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halt durch langsames Drücken des Pipettenknopfes bis zum ersten<br />
Drückpunkt die Spitzt entleeren. Bei Erreichen des ersten Druckpunkts<br />
darf noch keine Luftblase aus der Spitze treten (sonst Hinweis<br />
auf zu geringeses Volumen in der Pipette!); beim Drücken zum<br />
Erreichen des zweiten Druckpunktes muß dann Luft aus der Spitze<br />
treten (ist dies nicht der Fall, wurde die Spitze zu voll gefüllt, z.B.<br />
durch Fehler beim aufnehmen!). - Pipettenspitze nun aus der Lösung<br />
herausnehmen, prüfen, ob keine Resttröpfen an oder in der<br />
Spitze zurückgeblieben sind und Druckknopf langsam wieder loslassen!<br />
4 Arbeitsvorschrift: Kalibrieren einer Pipette<br />
1 Auf eine Präzisionswaage (Ablesegenauigkeit 0,1 mg) ein genügend<br />
großes Gefäß aufstellen (z.B. Uhrglas) und Gerät auf "0" tarieren<br />
2 Gewünschtes Volumen auf der Pipette einstellen<br />
3 Mit der Pipette Wasser aufziehen und vollständig auf das Uhrglas pipettieren.<br />
Die Temperatur des Wassers muß bekannt sein! (Dichte des<br />
Wassers bei 4°C: 1,000 g/mL, bei 20°C: 0,... g/mL.<br />
4 Wägeergebnis notieren<br />
5 Waage ohne das Uhrglas zu entlerren auf "0" tarieren.<br />
6 Arbeitsschritte 2 bis 5 noch 9 mal wiederholen<br />
7 Ergebnisse statistisch auswerten: Mittelwert und Standardabweichung<br />
berechnen.<br />
Dokument-Nr:<br />
ALV 001
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