Untersuchungen zum Vorkommen und zur gesundheitlichen ...

2.5 Zellkulturversuche, Toxizitätstests
Anders als bei physikalisch-chemischen und immun-chemischen Methoden, die zum
Nachweis und zur Identifizierung einzelner Toxine eingesetzt werden, können
biologische Testverfahren Hinweise zur Toxizität als Summenparameter liefern. Der
Einsatz von Bioassays ist sinnvoll, wenn man generell Hinweise auf Toxine im
Probenmaterial erhalten will.
Im Projekt kamen zwei unterschiedliche Bioassays zum Einsatz: Der MTT-
Zytotoxizitätstest (2.5.1) und ein Zellkulturtest zur Immunmodulation mit
Bronchialepithelzellen (A 549) und Makrophagen (2.5.2).
2.5.1 MTT - Zytotoxizitätstest
Ein wirkungsbezogener Zytotoxizitätstest (Gareis, 2006) ist der MTT-Test. Als
Zielzelle wird die bekanntermaßen gegenüber Mykotoxinen besonders empfindliche
SK-Zelllinie (Swine-Kidney) eingesetzt.
Der MTT-Test kann als Bioassay zur Untersuchung von Reinsubstanzen wie z.B.
Mykotoxinen (Reubel et al., 1987; Reubel et al., 1989; Hanelt et al., 1995) eingesetzt
werden, aber u.a. auch zur Untersuchung von Schimmelpilz- (Ostenfeld Larsen et al.,
2002; Langseth et al., 1999; Langseth et al., 1997;) und Bakterienkulturen (Mehrer et
al., 2003), sowie von Umweltproben (Baumaterialien, Filterproben, Stäube)
(Johanning et al., 1998; Gareis et al., 1999; Twaruzek et al., 2002).
Bei Umweltproben können auch nicht mikrobiell oder mikrobiell produzierte
Bestandteile eine zytotoxische Wirkung auf die Zielzellen haben. Deshalb muss man
Kontrollversuche durchführen, bei denen Referenzmaterialien verwendet werden, die
keine mikrobielle Besiedlung aufweisen aber ansonsten dem getesteten, mikrobiell
befallenen Material entsprechen.
Durch den Vergleich der Ergebnisse von Rohextrakten der Referenzproben mit
Extrakten zu untersuchender Proben aus jeweils dem gleichen Matrixmaterial kann
ein direkter Hinweis auf die Präsenz oder das Fehlen zytotoxisch wirkender Stoffe in
der Probe abgeleitet werden.
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