Untersuchungen zum Vorkommen und zur gesundheitlichen ...

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2.2.2 Probenahme, Transport und Lagerung der Luftproben Die Luftkeimessungen wurden mit einem Impaktor der Fa. Merck (MAS 100) durchgeführt. Es wurden zur Sammlung Nährmedien eingesetzt, die im LGA hergestellt und dem Institut für Innenraumdiagnostik zugeschickt wurden. Im 1. und 2. Objekt wurden jeweils 2 x 4 Nährböden mit jeweils 100 l beaufschlagt. im 3. und 4. Objekt zusätzlich jeweils 2 x 4 Nährböden mit 200 l. Die Luftprobenahmen erfolgten in den gleichen Räumen, in denen die Materialproben entnommen wurden. Zur Sammlung luftgetragener Partikel mittels Filtration wurde eine Probenahmepumpe der Fa. Holbach eingesetzt. An diese Pumpe wurde ein mit Polycabonatfiltern bestückter Probenhalter angeschlossen. Die Pumpe und der Probenhalter wurden vom LGA zur Verfügung gestellt. Zwischen Filterhalter und Pumpe wurde ein Gaszähler zur Ermittlung der angesaugten Luftmenge installiert. Wegen der starken Geräuschentwicklung waren Langzeitmessungen nicht in jedem Objekt möglich. Auch wurde in Einzelfällen eine Langzeitmessung von den Bewohnern nicht gewünscht, u.a. auch weil es keine Möglichkeit gab, zum gewünschten Zeitpunkt die Geräte abzuholen. Die Laufzeit der Pumpen war aus logistischen Gründen, aber auch wegen der zum Teil durch die Bewohner vorgegebenen Zeitbegrenzung der Probenahme unterschiedlich, was zur Folge hatte, dass das gesammelte Luftvolumen zwischen 4,85 m 3 bis 46,4 m³ schwankte. 2.2.3 Messungen im Zusammenhang mit der Probenahme Es wurde sowohl elektronisch wie auch mit Indikatorpaper der pH-Wert der Materialien im Labor gemessen. Vor Ort wurden mittels hygroskopischer Messung die Temperatur und die relative Feuchtigkeit im Bauteil an der Stelle, an der die Materialprobe entnommen wurde, ermittelt. Es wurde hierbei ein Messgerät der Fa. Ahlborn mit einem Temperatur- Feuchtefühler eingesetzt. 25
Es sollten auch mittels Datenloggern Langzeit-Raumklimamessungen durchgeführt werden. Dies war jedoch nur in den Objekten 1 und 2 möglich, da in anderen Objekten die Sanierung bereits erfolgt war, ein Auszug bevorstand oder es andere Hindernisse gab. Deshalb wurde schließlich auf diese Messungen verzichtet. In den Objekten 1 und 2 erfolgten die Langzeitmessungen mittels Datenlogger von Gann. In Objekt 1 ergab die hygrothermische Messung einen Feuchtewert von 100%. Aus diesem Grund wurde ergänzend eine gravimetrische Messung durchgeführt. Hierbei wird das Material unmittelbar nach der Probenahme gewogen und anschließend bei 15 °C so lange getrocknet bis kein Gewichtsverlust mehr auftritt. Der Gewichtsverlust wird auf das Gewicht der Trockensubstanz bezogen und als Materialfeuchte in % angegeben. 2.3 Kultivierungsabhängige Analysen Die Proben wurden von folgenden Verbundpartnern aufgearbeitet, quantifiziert und so weit als möglich identifiziert: Probe Bearbeitet durch 01 Putz LGA, Umweltmykologie, Hans-Knöll-Institut, Universität-Gießen, RWTH Aachen 01 Luft LGA, Universität-Gießen 02 Dämmwolle LGA, Umweltmykologie, Hans-Knöll-Institut, RWTH Aachen 02 Luft LGA 03 Styropor LGA, Umweltmykologie, Hans-Knöll-Institut, RWTH Aachen 03 Luft LGA 04 Dämmwolle LGA, Umweltmykologie, Hans-Knöll-Institut, RWTH Aachen 04 Luft LGA 05 mineralische Schütte LGA, Umweltmykologie, Hans-Knöll-Institut 06 Wandputz LGA, Umweltmykologie, Hans-Knöll-Institut 07 Wandputz LGA 08 Putz LGA 09 Putz Umweltmykologie 26
Seite 1 und 2: Texte 02 09 ISSN 1862-4804 Untersuc
Seite 3 und 4: Diese Publikation ist ausschließli
Seite 5 und 6: 1. Report No. UBA-FB 001229 4. Repo
Seite 7 und 8: Umweltmykologie GbR Berlin) 2.3.6.2
Seite 9 und 10: 3.3.3.1 Vorversuche zur Freisetzung
Seite 11 und 12: • Festlegung der morphologischen
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Seite 19 und 20: eines gemeinsamen Trainings wurde s
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Seite 25 und 26: Die Auswahl der Parameter entsprich
Seite 27: 2.2 Beschreibung der Probenahmestel
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Seite 35 und 36: 2.3.4 Festlegung der Dominanz einze
Seite 37 und 38: 2.3.5.3 Gram-Färbung Die Gram-Fär
Seite 39 und 40: Die DC-Platte wurde anschließend i
Seite 41 und 42: Für die Analyse der Fettsäuren er
Seite 43 und 44: 2.3.6 Konservierung Die Konservieru
Seite 45 und 46: eingewogen und etwas Zellmateriall
Seite 47 und 48: 2.4.1.3 DNA-Extraktion aus Kolonien
Seite 49 und 50: Plasmid-Primer M13 Primer 616 V / 1
Seite 51 und 52: Universelle 16S rRNA Primer (EUB-Pr
Seite 53 und 54: 2.4.2.2 Agarosegelelektrophorese Di
Seite 55 und 56: gemischt. Das Gemisch wurde zwei mi
Seite 57 und 58: Alle Schritte der Silbernitratfärb
Seite 59 und 60: Fragmente mit einem A-Überhang rel
Seite 61 und 62: 2.4.5 Sequenzierung durch Kettenabb
Seite 63 und 64: Der MTT-Zellkulturtest zeichnet sic
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Seite 75 und 76: 3.1.2.2 Übersicht über die häufi
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in den 24 untersuchten Proben (die
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In der Abb. 3 sind die Anteile der
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[Σ Gattungen] 25 20 15 10 5 0 WP 0
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Weiterhin bildeten einige Referenzi
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ähnliches Spektrum unterschiedlich
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Abb. 6: Referenzisolate der Gattung
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auf Hafermehl-, Gauze- und CASO-Aga
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Abb. 8: Koloniemorphologie der Refe
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3.1.2.5.2 Micromonospora Aus der Ga
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Abb. 15: Koloniemorphologien von 14
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3.1.2.5.5 Nocardiopsis Die Mehrzahl
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Abb. 25: 21 Tage alte Referenzisola
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Abb. 28: Abb. 29: Kleine Kulturen v
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Abb. 31: Kolonien (von unten aufgen
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Abb. 33: Abbildung der Luftmyzelien
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3.1.2.5.8 Saccharopolyspora Die Meh
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Abb. 39: Abb. 40: Streptomycetes-Ko
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Eine sichere Bestimmung auf der Pri
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3.1.4 Chemotaxonomische Untersuchun
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Die Identifizierung eines dieser 4
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Tab18: Chemotaxonomische Merkmale d
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Tab. 19: Chemotaxonomische Merkmale
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Tab. 20: Chemotaxonomische Merkmale
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Saccharothrix, Propionibacterium, P
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3.2.2 SSCP (Singel Strand Conformat
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Korrelation mit Hilfe einer Cluster
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Tab. 22: Referenzkonzentrationen vo
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angenommen (das gesamte Wachstum au
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Freisetzung von TNF-α in Abhängig
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ml. Dies deutet an, dass die Interl
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dieser Probe wurden nicht untersuch
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Erhöhung der TNF-alpha Freisetzung
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4 Diskussion 4.1 Ergebnisse und Sch
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Anzüchtung einzelner Isolate auf v
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molekularbiologischen Methoden für
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Nocardioidaceae detektiert werden.
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4.3.1 Molekularbiologische Identifi
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In der vorliegenden Studie wurden n
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Eine weitere Gattung, deren Vertret
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Actinomycetales besitzen L-Lysin, L
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PII PIM, PI, (PG), PE, DPG PIII (PI
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Pseudonocardia Pseudonocardiaceae m
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durchgeführt. Auch wenn mit beiden
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4.5 Diskussion der toxikologischen
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Nocardiopsis. Dies zeigt, dass man
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4.5.3 Diskussion - Gesundheitliche
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4.6 Zusammenfassung Diversität: Di
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Allein anhand koloniemorphologische
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4.6 Summary Diversity The results o
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cell wall, these methods are time-c
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Verzeichnis der Abbildungen Abb. 1:
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Verzeichnis der Tabellen Tab. 1: De
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Ensign, J.C. (1992): Introduction t
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Kutzner, H. J, Kempf, A. (1996): Vo
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Rintala, H., Pitkäranta, M., Toivo
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Anhang: Probendatenblätter Probend
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Objektbeschreibung Probendatenblatt
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Objekt 05 (Bad) Ergebnisse Feuchtig
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Probe 09 02-07/02 1 Filter 09.03.06
Seite 209 und 210:
Ergebnisse Feuchtigkeits- und Tempe
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pH-Wert Probe Nr. Material elektron
Seite 213 und 214:
Probe 12 06-07/02 (je 80 g) LGA 18.
Seite 215 und 216:
Ergebnisse Feuchtigkeits- und Tempe
Seite 217 und 218:
Versand an Probe 14 08-07/01 22.08.
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Versand an Probe 15 08-07/01 22.08.
Seite 221 und 222:
Probenahme Nr. Material Datum/Bearb
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Mikroskopie Zellform Stäb.-Kokken-
Seite 225 und 226:
7 Agar 15,0 g 8 Aqua dest. 1000 ml
Seite 227 und 228:
Glucose-Yeast-Malt-Agar (GYM STREPT
Seite 229 und 230:
Tab. A 1: API-ZYM-Test Isolat Agar
Seite 231 und 232:
Agrococcus ca. 1200 bp 0.01 53 228
Seite 233 und 234:
Arthrobacter, ca. 1260 bp, outgroup
Seite 235 und 236:
Brevibacterium ca. 1330 bp 0.01 84
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Corynebacterium Teil des phylogenet
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Janibacter ca. 1400 bp outgroup Orn
Seite 241 und 242:
Kocuria, ca. 1330 bp, outgroup Arth
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Kytococcus, ca. 1340 bp outgroup Br
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Leucobacter ca. 1360 bp 0.005 64 93
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Micrococcus, ca. 1350 bp, outgroup
Seite 249 und 250:
Micromonospora, ca. 1320 bp, outgro
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Nocardia, ca. 1280 bp, outgroup Mic
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Nocardiopsis, ca1300 bp, outgroup A
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Ornithinimicrobium /Arsenicicoccus,
Seite 257 und 258:
Promicomonospora, 1230 bp (14 Isola
Seite 259 und 260:
Rhodococcus, ca. 1230 bp, outgroup
Seite 261 und 262:
Tsukamurella, ca. 1400 bp, outgroup
Seite 263 und 264:
Nährmedium Dominanzklasse Putzprob
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Nährmedium Dominanz Styroporprobe
Seite 267 und 268:
Nährmedium Dominanzklasse Lehmputz
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Stammnummer KBE/g bzw. m 3 DAP Iden
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