Untersuchungen zum Vorkommen und zur gesundheitlichen ...

4.2 Isolierung von Actinomyceten
Die Isolierung der Actinomyceten von feuchten Materialien aus Innenräumen ist eine
komplexe Aufgabe, weil die Gruppe der Actinomyceten sehr unterschiedliche
Organismen mit sehr unterschiedlichen Wachstumsansprüchen enthält. Außerdem
stellen die zu untersuchenden Materialien (z.B. Wandputz) keine homogenen
Lebensbedingungen dar, sondern eine Vielzahl von Mikrohabitaten. Die Besiedlung
dieser Mikrohabitate durch spezifisch angepasste Mikroorganismen ist darüber
hinaus sehr stark von den Bedingungen vor Ort (insbesondere Feuchtigkeit und
Temperatur) abhängig. Um die unterschiedlichen Wachstumsansprüche der
Actinomyceten zu berücksichtigen, müssen unterschiedliche Nährmedien verwendet
werden.
Die Schwierigkeit dieses Projektes bestand darin, eine Einschätzung des zu
erwartenden Artenspektrums zu geben und gleichzeitig die Isolierungsstrategie zu
optimieren. Um den Stellenwert der Actinomyceten in den Proben erfassen zu
können, war außerdem neben einer qualitativen auch eine quantitative Erfassung
notwendig. Die vorgestellten Ergebnisse durch kultivierungsabhängige Methoden
(vergleiche Abb. 4 und 5) verdeutlichen, dass eine ausreichende Erfassung der
Actinomyceten nur durch umfangreiche Erfahrung und einen hohen Arbeitsaufwand
möglich ist. Neben dem hohen Arbeitsaufwand hat die Verwendung von
kultivierungsabhängigen Methoden weitere Nachteile. Insbesondere muss die
Auswertung der Ansätze innerhalb eines engen Zeitrahmens erfolgen und kann nicht
z.B. durch Einfrieren der Proben unterbrochen werden. Da Actinomyceten im
allgemeinen relativ langsam wachsen, besteht grundsätzlich die Gefahr, dass
Kulturen von der Begleitflora überwachsen oder unterdrückt werden. Um dieser
Beeinflussung entgegen zu wirken, wurden die Nährmedien mit dem Hemmstoff
Natamycin versetzt, der insbesondere Schimmelpilze stark hemmt, der aber ggf.
auch einen partiellen Einfluss auf die Entwicklung der Actinomyceten haben kann.
Mit den kultivierungsabhängigen Methoden wurde je nach Probe auf
unterschiedlichen Isolationsmedien jeweils die größte Ausbeute von morphologisch
verschiedenen Referenzisolaten festgestellt. Dabei war zu beachten, dass ein
Isolationsmedium, auf dem die höchste koloniemorphologische Vielfalt festgestellt
wurde, nicht gleichzeitig auch das Medium war, auf dem die höchsten
Gesamtkonzentrationen festgestellt wurden. Weiterhin wurde bei der weiteren
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