Untersuchungen zum Vorkommen und zur gesundheitlichen ...
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4.2 Isolierung von Actinomyceten<br />
Die Isolierung der Actinomyceten von feuchten Materialien aus Innenräumen ist eine<br />
komplexe Aufgabe, weil die Gruppe der Actinomyceten sehr unterschiedliche<br />
Organismen mit sehr unterschiedlichen Wachstumsansprüchen enthält. Außerdem<br />
stellen die zu untersuchenden Materialien (z.B. Wandputz) keine homogenen<br />
Lebensbedingungen dar, sondern eine Vielzahl von Mikrohabitaten. Die Besiedlung<br />
dieser Mikrohabitate durch spezifisch angepasste Mikroorganismen ist darüber<br />
hinaus sehr stark von den Bedingungen vor Ort (insbesondere Feuchtigkeit <strong>und</strong><br />
Temperatur) abhängig. Um die unterschiedlichen Wachstumsansprüche der<br />
Actinomyceten zu berücksichtigen, müssen unterschiedliche Nährmedien verwendet<br />
werden.<br />
Die Schwierigkeit dieses Projektes bestand darin, eine Einschätzung des zu<br />
erwartenden Artenspektrums zu geben <strong>und</strong> gleichzeitig die Isolierungsstrategie zu<br />
optimieren. Um den Stellenwert der Actinomyceten in den Proben erfassen zu<br />
können, war außerdem neben einer qualitativen auch eine quantitative Erfassung<br />
notwendig. Die vorgestellten Ergebnisse durch kultivierungsabhängige Methoden<br />
(vergleiche Abb. 4 <strong>und</strong> 5) verdeutlichen, dass eine ausreichende Erfassung der<br />
Actinomyceten nur durch umfangreiche Erfahrung <strong>und</strong> einen hohen Arbeitsaufwand<br />
möglich ist. Neben dem hohen Arbeitsaufwand hat die Verwendung von<br />
kultivierungsabhängigen Methoden weitere Nachteile. Insbesondere muss die<br />
Auswertung der Ansätze innerhalb eines engen Zeitrahmens erfolgen <strong>und</strong> kann nicht<br />
z.B. durch Einfrieren der Proben unterbrochen werden. Da Actinomyceten im<br />
allgemeinen relativ langsam wachsen, besteht gr<strong>und</strong>sätzlich die Gefahr, dass<br />
Kulturen von der Begleitflora überwachsen oder unterdrückt werden. Um dieser<br />
Beeinflussung entgegen zu wirken, wurden die Nährmedien mit dem Hemmstoff<br />
Natamycin versetzt, der insbesondere Schimmelpilze stark hemmt, der aber ggf.<br />
auch einen partiellen Einfluss auf die Entwicklung der Actinomyceten haben kann.<br />
Mit den kultivierungsabhängigen Methoden wurde je nach Probe auf<br />
unterschiedlichen Isolationsmedien jeweils die größte Ausbeute von morphologisch<br />
verschiedenen Referenzisolaten festgestellt. Dabei war zu beachten, dass ein<br />
Isolationsmedium, auf dem die höchste koloniemorphologische Vielfalt festgestellt<br />
wurde, nicht gleichzeitig auch das Medium war, auf dem die höchsten<br />
Gesamtkonzentrationen festgestellt wurden. Weiterhin wurde bei der weiteren<br />
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