Biochemie und Biotechnologie in der Schule: Hubertus ... - ChidS

5 Aminosäuren und DNA in der Schulpraxis
________________________________________________________________
kann, benötigt man einen geeigneten Puffer, der die DNA nicht denaturiert und
zerstört. Des weiteren muss der Puffer in der Lage sein, die Zellwand des
Zellkerns schonend aufzulösen. In dem Experiment wird für dieses Vorhaben
ein selbst angesetzter Lysepuffer verwendet, der mit einfachsten
Haushaltschemikalien angesetzt werden kann. Bei der Zellwand des Zellkerns
handelt es sich in der Regel um eine Doppel-Lipid-Schicht. Der Lysepuffer
muss also in der Lage sein, Fett zu lösen. Die einfachste Möglichkeit Fett in
Lösung zu bringen, sind Haushaltsspülmittel. Für den Lysepuffer wird deshalb
eine Mischung aus 20 mL Spülmittel und 180 mL destilliertem Wasser
verwendet. Um einen geeigneten pH-Wert zu erlangen, werden noch 6 g
Kochsalz dazugegeben. Ist der Lysepuffer angesetzt, kann mit dem Experiment
begonnen werden.
Das DNA-liefernde Material besteht im wesentlichen aus Obst. Dabei ist es
egal ob man Birnen, Äpfel, Bananen oder Tomaten benutzt, wobei der größte
Erfolg bei Tomaten und Bananen erzielt wird. In dem Experiment wurde
Tomatenmark verwendet, welches sich noch besser dazu eignet, da es sich um
fein püriertes Zellmaterial handelt, in dem die DNA noch in einem intakten
Zustand vorliegt. Eine kleine Dose des Tomatenmarks wird mit 20 mL
Lysepuffer versetzt und in einem Mörser kräftig durchmischt. Während des
Vorgangs werden die Zellwände, des meist noch intakten Zellkerns, aufgelöst,
wobei die DNA in Lösung geht. Diese wird in der pH-neutralen Lösung sehr
gut abgepuffert und denaturiert nicht. Der entstandene Brei wird im folgenden
abfiltriert. Man erhält eine klare, gelbliche Lösung (Abbildung 68).
211