Biochemie und Biotechnologie in der Schule: Hubertus ... - ChidS

5 Aminosäuren und DNA in der Schulpraxis
________________________________________________________________
intramolekularen Bindungen und Anziehungskräften entsteht aus einer
Polypeptidkette ein Protein.
Die Tatsache, dass Proteine in jedem Organismus vorhanden sind und
verschiedene Aufgaben übernehmen ist bekannt. Aus diesem Grund sollen im
nachfolgenden Experiment auch nicht Proteine, sondern deren Einzelbausteine
nachgewiesen werden. Da in fast jeder Zelle des Organismus Proteinbiosynthese
stattfindet, müssen in den Zellen auch freie Aminosäuren zur
Verfügung stehen, da sie eine der Voraussetzungen einer funktionierenden
Proteinbiosynthese sind. Daher sollen sie isoliert und nachgewiesen werden.
Aus Ausgangsmaterial für die Isolierung dient eine Möhre. Für den Nachweis
wird die bekannte Methode der Dünnschichtchromatographie mit
anschließender Dedektion mittels Ninhydrin-Sprühreagenz angewendet.
Zuerst wird eine Möhre mit Hilfe einer Küchenraspel möglichst klein geraspelt.
Die erhaltenen Raspeln gibt man anschließend in einen Mörser und zerreibt sie
kräftig. Diese Methode dient vor allem der Zerstörung der Zellwände, so dass
ein Teil des Zellinhaltes vorliegt. Dabei entsteht eine Art „Möhrensaft“, da die
Zellen natürlicherweise einen hohen Anteil an Wasser besitzen, der ebenfalls
freigesetzt wird. Im entstandenen „Möhrensaft“ sollten auch die freien
Aminosäuren enthalten sein. Des weiteren sind typische Farbstoffe wie
beispielsweise Carotinoide, einige Duftstoffe und Proteine im „Mörensaft“
gelöst. Um die groben Bestandteile aus der Lösung herauszubekommen, siebt
man die entstandene Lösung durch ein feines Haushaltssieb. Der so entstandene
Saft wird im folgenden abzentrfugiert. Die Zentrifugation dient dazu, dass sich
die groben Zellbestandteile, wie z.B. die Zellorganellen und einige große
Proteine, am Boden des Zentrifugenglases absetzen. Der Überstand wird zur
weiteren Verarbeitung genutzt. Er wird mit der vierfachen Menge an Ethanol
versetzt und für fünf Minuten auf Eis gestellt. Diese Methode benutzt man zur
Denaturierung aller Proteine und der DNA:
Der Ethanol löst die Hydrathülle auf, die sich um die Proteine und die DNA
ausgebildet hat und bringt die Moleküle somit zur Denaturierung.
207