Biochemie und Biotechnologie in der Schule: Hubertus ... - ChidS

4 Enzyme in der Schule
________________________________________________________________
DC-Platte angelangt, so dass die Chromatographie an diesem Punkt beendet ist.
Die Platten werden der Kammer entnommen, kurz getrocknet und mit
Ninhydrin-Sprühreagenz versetzt. Anschließend kommen sie bei ca. 105 °C in
den Trockenschrank. Nach ca. fünf Minuten werden die Karten entnommen und
ausgewertet (siehe Abbildung 44)
Abb. 44: DC von Gelatine mit Fruchtbromelain
Man kann deutlich erkennen, dass weder die Gelatinelösung noch die
Fruchtbromelainlösung eine positive Farbreaktion mit dem Sprühreagenz
auslösen. Dafür kann man deutliche Banden für die Aminosäuren Glycin und
Alanin erkennen. Auch beim Gelatinehydrolysat sind deutliche Banden der
beiden Aminosäuren Glycin und Alanin zu erkennen.
Somit kann man eindeutig nachweisen, dass Fruchtbromelain die Gelatine in
ihre Monomere gespalten hat. Das Enzym spaltet hydrolytisch die
Peptidbindungen der Gelatine und zersetzt sie in ihre monomeren Bausteine,
die Aminosäuren.
Gelantine besteht zu 25 % aus Glycin, zu 18 % aus Prolin, zu 14 % aus
Hydroxyprolin, zu 11 % aus Glutaminsäure und zu 8 % aus Alanin. Die
restlichen 24 % teilen sich auf weitere Aminosäuren auf, deren Gehalt unter
5 % liegt. Mit hilfe der Dünnschichtchromatographie wurden sowohl die
139