Biochemie und Biotechnologie in der Schule: Hubertus ... - ChidS

4 Enzyme in der Schule
________________________________________________________________
HN -
HN -
O O
N
H
Cu 2+
H
N
O O
Cu-Biuret-Komplex
Die gleiche intensive Farbreaktion lässt sich nun auch bei Polypeptiden
beobachten. Dabei müssen diese mindestens drei Peptidbindungen besitzen.
Somit kann man anhand dieser Farbreaktion sowohl einen qualitativen als auch
einen quantitativen Proteinnachweis durchführen.
In dem ersten Experiment, wurde das Enzym Urease untersucht.
Ausgangspunkt ist eine Kupfersulfatlösung (c = 1 mol/L), die mit einer
Natriumhydroxidlösung (c = 2 mol/L) versetzt wird. Zur besseren Vergleichbarkeit
wird das angesetzte Lösungsgemisch in zwei gleich große Mengen
aufgeteilt. Dabei dient eine der beiden Lösungen als Vergleichsprobe. Zu der
anderen Lösung gibt man eine Spatelspitze Urease und beobachtet die
Farbgebung der Lösung. Danach erhitzt man das betreffende Gemisch leicht
und vergleicht erneut die Farbe der Lösungen.
Die Cu 2+ -Ionen der Kupfersulfatlösung bilden mit den Hydroxidionen der
Natriumhydroxidlösung den blauen Kupferhydroxokomplex aus ([Cu(OH)4] 2- ).
Diese Lösung bildet den Ausgangspunkt der Untersuchung. Zu dieser Lösung
gibt man im Anschluss eine Spatelspitze Urease und beobachtet die
Farbveränderung. Es kommt zu einer strak blauen Färbung der Lösung, die in
Abbildung 34 veranschaulicht ist.
NH -
NH -
111