Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

3 OPTIMIERUNG DER HPLC- UND GC-METHODEN 65
3.4.1.3 Detektion der biogenen Amine
Die Detektion erfolgte mittels eines Diodenarray-Detektors (DAD) bei einer Absorpti-
onswellenlänge von 265 nm ± 10 nm.
3.4.2 Quantifizierung der biogenen Amine
Zur Quantifizierung der BA-Gehalte in den Proben wurden anhand der Injektion der
fünf Standardgemische von 5; 10; 50; 100 sowie 250 μM die Regressionsgeraden (y
= ax + b) zu jeder BA über Auswertung der jeweiligen Peakflächen bestimmt. Die
Gleichungen der Regressionsgeraden und die Bestimmtheitsmaße sind in Anhang
aufgeführt.
3.4.3 Nachweis- und Bestimmungsgrenzen
Die Nachweisgrenze (siehe Kap. 3.2.3) der einzelnen BA in absolut injizierter Stoff-
menge [pmol] sind für die PNZ-Cl-Methode in der Tabelle 3-9 dargestellt. In der vor-
liegenden Methode wurde als Bestimmungsgrenze für jede BA 5 μM festgelegt.
Tab. 3-9: Nachweisgrenze (NG) der einzelnen BA für die Analyse mittels
HPLC nach Derivatisierung mit PNZ-Cl
Biogene Amine NG [pmol] Biogene Amine NG [pmol]
Putrescin 0,6 Histamin 1,1
Tryptamin 1,5 Tyramin 0,4
β-Phenylethylamin 1,8 Spermidin 0,9
Octopamin 0,6 Spermin 4,2
Cadaverin 1,2