Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

3 OPTIMIERUNG DER HPLC- UND GC-METHODEN 62
Abb. 3-8: Schema der Derivatisierung der Amine mit PNZ-Cl nach KIRSCH-
BAUM et al. [173]
3.4.1.2 Chromatographische Trennungen der biogenen Amine
Die Trennung der untersuchten Aminosäuren erfolgte mittels eines tertiären Gra-
dientensystems auf einer Superspher 100 RP-18e-Säule bei einer Säulenofentem-
peratur von 35 ° C. Das Gradientenprogramm zur Trennung der PNZ-Cl-Derivate ist
in Tabelle 3-8 dargestellt. Als Eluent A und C diente dabei jeweils ein Acetatpuffer
(100 mM, pH 6,1 bzw. pH 4,3). Eluent B war reines Acetonitril. Das mit diesem Gra-
dientenprogramm erhaltene Standardchromatogramme sind in Abbildung 3-9 ge-
zeigt.
20 μl Probe bzw. STD
200 μl KBP
100 μl PNZ-Cl
Derivatisierung (10 min)
100 μl Gly
Derivatisierung (3 min)
20 μl Injektion
100 μl MeCN