Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

3 OPTIMIERUNG DER HPLC- UND GC-METHODEN 56
3.3.2 LaChrom System
3.3.2.1 Optimierung der chromatographischen Bedingungen
3.3.2.1.1 Vollautomatisierte Vorsäulenderivatisierung der Amino-
säuren
Die Derivatisierung der AS erfolgte unter Verwendung eines programmierbaren Au-
tosamplers (Abb. 3-5). Im ersten Schritt der Derivatisierung wurde zuerst die analy-
sierende Probe bzw. Standard, Kaliumboratpuffer, OPA und IBLC- bzw. IBDC-
Reagenz hintereinander aufgezogen und in Reaktions-Vial überführt. Nach mehrma-
ligen Mischen und einer Reaktionszeit von 120 Sek. wurde 20 μl des Aliquotes der
Lösung in die HPLC-Apparatur injiziert.
100 μl Probe bzw. STD
Derivatisierung (120 Sek.)
250 μl Injektion
450 μl KBP
80 μl OPA
20 μl IBL/DC
Abb. 3-6: Schema der Derivatisierung der AS mit OPA/IBL(D)C unter Verwendung
eines programmierbaren Autosamplers