Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

3 OPTIMIERUNG DER HPLC- UND GC-METHODEN 54
3.3.1.1.3 Detektion der Aminosäuren Chromatographische Trennun-
gen
Die Fluoreszenzspektren des Reagenzes bzw. seiner Derivate ergaben Maxima bei
einer Anregungswellenlänge von 230 nm und einer Emissionswellenlänge von 445
nm. Als Signalverstärkung wurde die Einstellung PMT Gain 10 gewählt.
3.3.1.2 Quantifizierung der Aminosäuren
Zur Quantifizierung der AS-Gehalte in den Proben wurden anhand der Injektion der
fünf Standardgemische von 5, 10; 50; 100 sowie 200 μM die Regressionsgeraden
(y = ax + b) zu jeder AS über Auswertung der jeweiligen Peakflächen bestimmt. Die
Gleichungen der Regressionsgeraden und die Bestimmtheitsmaße sind in Anhang
aufgeführt.
3.3.1.3 Nachweis- und Bestimmungsgrenzen
Die Nachweisgrenze der einzelnen AS (siehe Kap. 3.2.3) in absolut injizierter Stoff-
menge [pmol] sind für die OPA/IBLC- bzw. IBDC-Metohden in der Tabelle 3-5 dar-
gestellt. In der vorliegenden Methode wurde als Bestimmungsgrenze für jede Ami-
nosäure 5,0 μM festgelegt.