Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

3 OPTIMIERUNG DER HPLC- UND GC-METHODEN 48
Tab. 3-1: Grandientenprogramm zur Trennung der OPA/MPA-FMOC-Derivate der
Aminosäuren auf einer NovaPak C18 RP-Säule (300 mm x 3,9 mm I.D.,
Waters). Eluent A: Natriumacetat (0,1 M, pH 6,5) mit Zusatz von TEA
(0,044 %, v/v), Eluent B: MeCN (100 %).
Zeit
[min]
Eluent A
[%]
Eluent B
[%]
Flußrate
[ml/min]
0,0 100,0 0,0 0,8
6,0 100,0 0,0 0,8
8,0 95,0 5,0 0,8
17,0 92,0 8,0 0,8
25,0 92,0 8,0 0,8
30,0 88,0 12,0 0,8
42,0 82,0 18,0 0,8
55,0 78,0 22,0 0,8
60,0 73,0 27,0 0,8
75,0 73,0 27,0 0,8
77,0 0,0 100,0 0,8
82,0 0,0 100,0 0,8
82,1 100,0 0,0 0,8
87,0 100,0 0,0 0,8
3.2.1.3 Detektion der Aminosäuren
Die Fluoreszenzspektren des Reagenzes bzw. seiner Derivate ergaben Maxima bei
einer Anregungswellenlänge von 330 nm und einer Emissionswellenlänge von 445
nm für OPA/MPA-Derivate und bei 263 und 312 nm für FMOC-Cl. Das Detektions-
programm des FLD ist in Tabelle 3-2 aufgezeigt.