Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

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Stammlösungen mit MKB-Gemisch in den Konzentrationen 5, 10, 50, 100 und 200
μM im Bezug von L-AS hergestellt. Als interner Standard wurde L-Abu verwendet.
Um eine Konzentration von 100 mM zu erhalten, wurden 103,1 mg L-Abu eingewo-
gen und anschließend mit MKB auf 10 ml aufgefüllt. Alle Stammlösungen und Stan-
dardgemische wurden bei -18 ° C aufbewahrt.
System LaChrom
Es wurden die selben Aminosäurenstammlösungen verwendet und durch Verdün-
nung der Stammlösungen mit MKB-Gemisch in den Konzentrationen 0,5, 1, 2,5, 5,
10 und 20 μM im Bezug von L-AS hergestellt.
2.3.2.2 Reagenzien für OPA/IBL(D)C-Derivate
Kaliumboratpuffer (1 M, pH 10,4 )
6,184 g Borsäure wurden zur Herstellung eines 1 M Kaliumboratpuffers in 80 ml bi-
dest. Wasser gelöst. Der Ansatz wurde mit 5 M KOH auf pH 10,4 eingestellt und an-
schließend mit bidest. Wasser auf 100 ml aufgefüllt.
OPA/IBL(D)C
22,80 mg OPA und 49,75 mg IBLC bzw. IBDC wurden in 1 ml 1 M Kaliumboratpuffer
pH 10,4 gelöst und bei -18 ° C aufbewahrt.
System LaChrom
80 mg OPA wurden in 5 ml MeOH und 95 ml 1 M Kaliumboratpuffer pH 10,4 gelöst.
Für IBLC bzw. IBDC wurden 24 mg eingewogen und jeweils in 5 ml MeOH gelöst.
2.3.2.3 Eluenten für OPA/IBL(D)C-Derivate
Eluent A (23 mM Natriumacetatpuffer pH 6,0)
3,130 g Natriumacetattrihydrat wurden in ca 990 ml bidest. Wasser gelöst und mit 10
% Essigsäure auf pH 6,0 eingestellt. Nach dem Auffüllen auf 1 l wurde der Eluent