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Analytik von Aminosäuren und biogenen Aminen in fermentierten ...

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6 ZUSAMMENFASSUNG 149<br />

Orn <strong>und</strong> Cit im Vergleich zu Weizenmiso auf. Bei dieser Untersuchung wurde fest-<br />

gestellt, daß das Verhältnis zwischen den Anteilen <strong>von</strong> Arg <strong>und</strong> Orn als e<strong>in</strong> Kriterium<br />

für die Bestimmung der Fermentationsdauer dienen könnten.<br />

Zur Trennung <strong>und</strong> Bestimmung <strong>von</strong> freien D-AS wurde e<strong>in</strong>e chirale HPLC-Methode<br />

nach Vorsäulenderivatisierung mit o-Phthaldialdehyd <strong>und</strong> N-Isobutyryl-L (bzw. D)-<br />

cyste<strong>in</strong> (OPA/IBL(D)C) verwendet. Außerdem wurde die Anwendbarkeit der<br />

OPA/IBL(D)C-Methode für verschiedene HPLC-Apparaturen zur enantioselektiven<br />

<strong>Am<strong>in</strong>osäuren</strong>analytik am Beispiel <strong>von</strong> LaChrom - <strong>und</strong> HP 1090-System überprüft.<br />

In allen untersuchten <strong>fermentierten</strong> Sojaprodukten wurden erhebliche Mengen an<br />

D-AS gef<strong>und</strong>en. Dabei wurde festgestellt, daß besonders D-Asp <strong>und</strong> D-Ala als Mar-<br />

ker für Fermentation dienen könnten. In <strong>fermentierten</strong> Sojasaucen war D-Ala auf-<br />

gr<strong>und</strong> der Aktivität der mikrobiellen Ala-Racemase dom<strong>in</strong>ierend. In gemischten So-<br />

jasaucen war D-Asp aufgr<strong>und</strong> der Säurehydrolysierung der Rohmaterialien Major-D-<br />

AS. Im Falle der Misountersuchung konnte D-Ala für die Bestimmung der Fermenta-<br />

tionsdauer festgestellt werden. Aufgr<strong>und</strong> der unterschiedlichen Reifungsdauer war<br />

D-Ala <strong>in</strong> Reispepperonipasten sowie D-Asp <strong>in</strong> Weizenpepperonipasten dom<strong>in</strong>ierend.<br />

Sake <strong>und</strong> Fischsaucen wiesen e<strong>in</strong>e hohe Gehalte an D-Asp, D-Glu, D-Ser, D-Pro<br />

<strong>und</strong> D-Ala auf.<br />

Biogene Am<strong>in</strong>e wurden als Ergänzung zur Qualitätskontrolle für fermentierte Le-<br />

bensmittel unter E<strong>in</strong>satz e<strong>in</strong>er HPLC-Methode nach Vorsäulenderivatisierung mit<br />

para-Nitrobenzyloxycarbonylchlorid (PNZ-Cl) analysiert. Die Gesamtgehalte an BA<br />

lagen zwischen 79 mg/l <strong>und</strong> 1215 mg/l <strong>in</strong> Sojasaucen sowie zwischen 75 mg/kg <strong>und</strong><br />

1085 mg/kg <strong>in</strong> Miso. Pepperonipasten wiesen bed<strong>in</strong>gt durch den verlangsamten<br />

Fermentationsverlauf e<strong>in</strong>en niedrigen BA-Gehalt auf. In Sake konnten Pea <strong>und</strong> Oct<br />

<strong>in</strong> allen sowie Spd <strong>und</strong> Spm <strong>in</strong> e<strong>in</strong>er Probe detektiert werden.<br />

Die OPA/IBL(D)C-Methode ermöglicht die Trennung aller prote<strong>in</strong>ogenen L-AS <strong>und</strong><br />

der entsprechenden D-Enantiomere (17 DL-AS Paare), Glyc<strong>in</strong>, Gaba, DL-Cit, DL-<br />

Orn sowie des <strong>in</strong>ternen Standards L-Abu mit Ausnahme <strong>von</strong> Prol<strong>in</strong> <strong>und</strong> Cyst(e)<strong>in</strong><br />

mittels System HP 1090 an e<strong>in</strong>er konventioneller RP-18-Phase (Hypersil ODS2)<br />

unter Verwendung e<strong>in</strong>es e<strong>in</strong>fachen l<strong>in</strong>earen Gradienten <strong>in</strong>nerhalb <strong>von</strong> 75 m<strong>in</strong> <strong>in</strong> ei-<br />

nem chromatographischen Lauf. Der Wechsel <strong>von</strong> IBLC auf IBDC führt dabei zu ei-<br />

ner Elutionsumkehr <strong>in</strong>nerhalb der Enantiomerenpaare, bei Derivatisierung mit IBLC

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