Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
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Ergebnisse Seite 84<br />
Abb. 18 Kinetikanalyse <strong>der</strong> Antigenprozessierung durch KMM∅<br />
KM-Zellen wurden für 11 Tage in Gegenwart von M-CSF kultiviert. An Tag 10 wurden die Zellen in<br />
einer Dichte von 1x10 6 Zellen/ml in 24 Well-Platten umgesetzt. Antigenzugabe von 25µg FITC-OVA<br />
für die angegebene Zeitdauer. Die Zell-Solubilisierung erfolgte in den Platten. Nachweis durch<br />
Fluoreszenzaktivierung und Aufnahme <strong>der</strong> Signale mit einer CCD-Kamera.<br />
A:unst<strong>im</strong>ulierte Makrophagen . B: LPS-St<strong>im</strong>ulation für 72h, 1µg/ml C: St<strong>im</strong>ulation mit 20U rrγ-IFN für<br />
72h.<br />
1=5min, 2=10min, 3=20min, 4=30min, 5=40min,6=50min,7=60min,8=120min,9=240min<br />
Antigenpulse<br />
Aus drucktechnischen Gründen wurde die Lage <strong>der</strong> Banden mit roten Linien gekennzeichnet.<br />
Um einen besseren Einblick über das Abbauverhalten gewinnen zu können, wurde nach<br />
Trennung <strong>der</strong> Fragmente in <strong>der</strong> SDS – PAGE eine densitometrische Auswertung <strong>der</strong> Gele<br />
durchgeführt. Diese bietet gegenüber <strong>der</strong> rein optischen Auswertung <strong>der</strong> Gele den Vor-