Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
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Material und Methoden Seite 59<br />
Bedingungen durchzuführen. Alle Pr<strong>im</strong>er wurden so gewählt, dass sie über eine GC –<br />
Gehalt von 50% verfügten. Das Schaltprogramm für die Standard – PCR ist in Tab. 10b<br />
aufgeführt. Von den erhaltenen PCR – Produkten wurden 10µl elektrophoretisch aufge-<br />
trennt und durch Fluoreszenz nachgewiesen.<br />
2.8 Fotodokumentation<br />
Zur Dokumentation <strong>der</strong> Ergebnisse ist es nötig, von SDS- Gelen Positiv- Abzüge zu<br />
erstellen. Ebenso sind die Röntgenfilme nach <strong>der</strong> Belichtung zu entwickeln. Alle<br />
Schwarzweiß - Fotoarbeiten wurden <strong>im</strong> institutseigenen Fotolabor durchgeführt.<br />
2.8.1 Entwicklung <strong>der</strong> Röntgenfilme<br />
• Röntgenfilm Kodak X-OMAT ARS (Kodak)<br />
Reflection NEF-486 (Du Pont)<br />
• Entwickler Kodak LX 24, 1:5 (Kodak)<br />
• Fixierer Kodak AL 4, 1:5 (Kodak)<br />
Zur Entwicklung <strong>der</strong> Röntgenfilme wurden diese in einer Dunkelkammer drei Minuten in<br />
<strong>der</strong> Entwicklerlösung unter Bewegung inkubiert, anschließend kurz in Wasser gelegt<br />
und für zehn Minuten in <strong>der</strong> Fixierlösung fixiert. Danach wurden die Filme für mindes-<br />
tens zehn Minuten gewässert und an <strong>der</strong> Luft getrocknet.<br />
2.8.2 Herstellung und Entwicklung von Negativaufnahmen<br />
• Negativfilm Agfaortho Professional (ISO 25)<br />
Ilford Pan F (ISO 50)<br />
• Reprokamera Leica MD-2<br />
• Reproanlage Reprovit IIa (Leica)<br />
• Leuchtbox Leitz<br />
• Entwicklerdose Typ 1236 (Jobo)<br />
• Negativentwickler Rodinal 1:25 (Agfa)<br />
• Fixierer Agefix 1:8 (Agfa)<br />
• Netzmittel Agepon 0,5% (Agfa)<br />
Gele wurden <strong>im</strong> Durchlicht mit Blende 11 und Belichtungszeiten von 1/60, 1/30 und<br />
1/15 sec aufgenommen. Montagen von Positivabzügen wurden <strong>im</strong> Auflicht mit Belich-