Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
Material und Methoden Seite 30<br />
0,3 M SDS (1,5 ml 20 % SDS-Lsg./ 100 ml)<br />
ad 100 ml, mit konz. HCl auf pH 8,45 eingestellt<br />
• Lösung C 20 % (w/v) Acrylamid (280 g/l)<br />
0,735 % (w/v) N,N´- Methylenbisacrylamid (7,35 g/l)<br />
• LösungD 95,75 (v/v) 1 M Tris/HCl pH 7,0<br />
4 % (v/v) SDS 20 %<br />
0,25 (v/v) TEMED (Tetramethylethylendiamin)<br />
• Lösung E 48 % (w/v) Acrylamid<br />
1,5 % (w/v) N,N'-Methylen-Bisacrylamid<br />
• Glycerin<br />
• SDS - Lösung 20 % 20 % (w/v) SDS (20 g/100 ml)<br />
• APS - Lösung 10% 10 % (w/v) APS (1 g/10 ml)<br />
2.3.2.2 Zusammensetzung <strong>der</strong> Gele<br />
Die Gellösungen wurden gemäß folgen<strong>der</strong> Tabelle pipettiert, wobei darauf geachtet wur-<br />
de, dass die Lösungen gut durchmischt wurden :<br />
Zu <strong>der</strong> jeweiligen Gellösung wurden kurz vor dem Gießen 100 µl 10 % APS - Lösung<br />
hinzugegeben.<br />
GEL 10 % 12 % 14 % 16 %<br />
Lösung A (ml) 3,00 3,00 3,00 3,00<br />
Lösung C (ml) 8,48 10,18 11,87 13,56<br />
Glyzerin (ml) 3,00 3,00 3,00 3,00<br />
Aqua bidest. (ml) 9,40 7,70 6,01 4,32<br />
SDS 20 % (µl) 120 120 120 120<br />
Tab. 3 Zusammensetzung <strong>der</strong> Gellösungen für Glycin-Gele<br />
Zusammensetzung des Stackers für Glycin – Gele : 1 ml Lösung C, 1 ml Lösung D, 4 ml<br />
Aqua bidest sowie 80 µl 10 % APS<br />
Lösung Stacker 10% 16,5%<br />
Lösung E (ml) 0,5 5,1 8,3<br />
Lösung B (ml) 1,5 8,3 8,3<br />
Glyzerin (ml) / 3 3<br />
Aqua bidest. (ml) 4,0 8,6 5,3<br />
TEMED (µl) 10 20 20<br />
Tab. 2 Zusammensetzung <strong>der</strong> Gellösungen fürTricin- Gele