Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung

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Zellen dieser Mäuse können intakte Antigene nicht präsentieren, ebenso ist die Präsen-
tation von Antigen - Peptiden vermindert; die MHC Klasse II - Moleküle sind überwie-
gend mit CLIP assoziiert und zeigen keine SDS - Stabilität [69 a - b].
Diese Befunde legen folgende Funktion für DM nahe: Da CLIP nur eine geringe Bin-
dungsaffinität zu MHC Klasse II - Molekülen aufweist, könnte DM die Funktion eines
Peptidaustauschers ausüben. Die Freisetzung von CLIP aus der Bindungsgrube von
MHC Klasse II - Molekülen durch DM konnte in in vitro Studien gezeigt werden; die MHC
Klasse II - Moleküle konnten anschließend Peptide binden, was zu SDS stabilen MHC
Klasse II - Molekülen führte. Auch andere Peptide als CLIP können durch DM aus der
MHC Klasse II Bindungsgrube gelöst werden [70 a - b]; in diesem Zusammenhang wird
eine „Editor“ - Funktion von DM diskutiert [71]. Die fehlende SDS - Stabilität von aus
DM - defizienten Zellen isolierten MHC Klasse II - Molekülen könnte auf eine Chaperon -
Funktion von DM bei der Faltung von MHC Klasse II Molekülen hinweisen.
Professionelle antigenpräsentierende Zellen wie B - Zellen und dendritische Zellen
exprimieren DM konstitutiv, jedoch nur in geringen Mengen [72]. Aufgrund der geringen
Konzentration an DM ist eine katalytische Wirkung sehr wahrscheinlich.
1.4 Problemstellung der Arbeit
Die Generierung antigener Peptide in Antigenpräsentierenden Zellen und die Beladung
von MHC Klasse II – Molekülen mit diesen Peptiden ist das zentrale Ereignis der Klasse
II restringierten Antigenpräsentation. Bei diesen Prozessen wird festgelegt, welche Epito-
pe, d.h. Sequenzbereiche, eines Proteinantigens auf der Zelloberfläche präsentiert wer-
den.
Die Kernmoleküle dieses Prozesses, MHC Klasse II, DM und die invariante Kette sind
gut charakterisiert. Ebenso liegt die Röntgen - Struktur der Molekülkomplexe vor. Die
an der Prozessierung von internalisierten Proteinen beteiligten Enzyme sind jedoch nicht
einwandfrei identifiziert. Daher ist es von großem Interesse, die Vorgänge der Spaltung
von Proteinen auf Molekülebene, d.h. der Antigenprozessierung im engeren Sinne, zu
erforschen. Zudem ist der Einfluss des Aktivierungszustand in verschiedenen akzessori-
schen Zelltypen auf die Prozessierung weitgehend unerforscht.
In dieser Arbeit wurde die Antigen - Aufnahme und Prozessierung in Makrophagen und
dendritischen Zellen aus Knochenmarkskulturen der Lewis Ratte in den Vordergrund