Protein ? Disassembly im Verlauf der endosomalen Prozessierung

Diskussion Seite 138
4. Diskussion
Im Rahmen dieser Dissertation wurde die endosomale Aufnahme des Modellproteins
FITC-OVA und dessen Prozessierung in Makrophagen und dendritischen Zellen, den
Hauptrepräsentanten antigenpräsentierender Zellen untersucht. Durch Kinetikexperi-
mente konnten Kenntnisse über den Ablauf der proteolytischen Spaltung von FITC-OVA
in unterschiedlich aktivierten Makrophagen und in den dendritischen Zellen gewonnen
werden. Mittels Inhibitions - Studien konnten der initiale Vorgang der Spaltung des
Modellproteins weiter aufgeklärt und neue Aspekte der Antigenprozessierung ermittelt
werden. Die Edmann – Sequenzierung eines in Makrophagen generierten Abbaufrag-
ments ergab die exakte Lage einer Spaltstelle innerhalb der Ovalbumin – Struktur. Auf
der Grundlage von Röntgenstrukturdaten von bekannten MHC Klasse II – Molekülen
konnte durch Molecular Modelling eine Struktur des Ratten MHC Klasse II – Moleküls
RT1.B l ermittelt werden. Das berechnete Molekülmodell ermöglichte ein tieferes Ver-
ständnis der Peptidbindung in der Bindungsgrube des RT1.B l – Moleküls.
Der Synthese- und Expressionsweg der MHC Klasse II – Moleküle ist intensiv untersucht
und in Teilen gut verstanden. Über die Vorgänge der Antigen – Prozessierung und die
Vorgänge der Peptid – Beladung liegen vergleichsweise wenig Daten vor. Über folgende
Aspekte besteht in der Literatur ein Konsens [Review in 129]:
ÿ Die Antigenpräsentierenden Zellen nehmen Proteinantigene mittels Pinozytose, rezep-
torvermittelte Endozytose, Makropinozytose oder Phagozytose auf.
ÿ Nach Internalisierung des Antigens wird dieses in endo-/lysosomalen Kompartimen-
ten durch Exo- und Endoproteinasen abgebaut.
ÿ Im Peptid – Bindungskompartiment MIIC wird CLIP, ein Peptid der invarianten Ket-
te, gegen Peptidfragmente in der Bindungsgrube des MHC Klasse II – Moleküls in ei-
ner DM – vermittelten Reaktion ausgetauscht.
ÿ Die Peptide werden vor oder nach ihrer Bindung in der Peptidbindungsgrube auf die
typische Länge von 10-20 Aminosäuren gekürzt.
ÿ Der MHC Klasse II – Peptid Komplex wird zur Zelloberfläche der Antigenpräsentie-
renden Zelle transportiert und dort dem T - Zell Rezeptor einer T - Helferzelle darge-
boten.