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I. 2. Ergebnisse
2.7.3. brat-RNAi führt zu ähnlichen, aber von nos/pum RNAi abgrenz-
baren Phänotypen
RNAi-Experimente gegen brat wurden mit dsRNA eines 713 bp Fragment der
NHL-Domäne durchgeführt.
In der Folge von brat-RNAi treten kombinierte morphologische Veränderungen
der larvalen Kutikula auf (Abb. 19, A, B). Kopfdefekte gehen einher mit Verkürzungen
des Abdomens. Die Penetranz der RNA-Interferenz dieser Experimente ist hoch, d.h.
es treten keine Wildtyp-Larven auf. Meist bleiben 4 bis 7 abdominale Segmente
zurück, terminale Strukturen können fehlen (Abb. 19, A). Auch im Kopf zeigen sich
Defekte. Die Antennen scheinen häufig verkürzt und die Morphologie der Mandibeln
leicht gestört zu sein, wobei der Incisivi-Teil der Mandibeln reduziert ist (Abb. 19, B).
Außerdem ist das labiale Segment in der Regel ganz oder teilweise deletiert (Abb.
19, Pfeil in B). Hinzu kommen vereinzelte Veränderungen (vor allem Deletionen) der
anderen Mundwerkzeuge (nicht gezeigt). Zusätzlich zu diesen anterioren und poste-
rioren Defekten kommt es auch zu Deformationen in thorakalen Segmenten. Dort
treten Deletionen einzelner Beine, Deformationen des Prätarsus und Missbildungen
kompletter Beine auf (Abb. 19, bzw. nicht gezeigt).
Diese in Kutikulapräparationen auftretenden brat-RNAi-Phänotypen können zum
größten Teil auf frühe embryonale Prozesse zurückgeführt werden. So sind die
Deletion des labialen Segments und die Defekte thorakaler Segmente schon im
Expressionsmuster des Segmentpolaritätsgens wg ablesbar (Abb. 19, C, D). Aller-
dings besteht zwischen der Stärke der in larvalen Stadien beobachtbaren abdomina-
len Phänotypen und den Defekten der posterioren Segmentierung in Keimstreifsta-
dien eine Diskrepanz. Während Larven mit nur 3 oder 4 abdominalen Segmenten
auftreten, finden sich in Keimstreifen stets mindestens 7 abdominale Segmentanla-
gen. Es ist also möglich, dass hier Defekte zum Teil erst während der Differenzierung
der Segmente auftreten, also sekundär eine Reduktion der Segmente nach sich
ziehen. Der Blick auf frühere Entwicklungsstadien macht allerdings deutlich, dass die
hier beschriebenen Embryonen den RNAi-Effekt höchstwahrscheinlich nur in schwa-
cher Ausprägung zeigen, da sie auf deutliich stärkere Defekte hinweisen.
So verdeutlicht der Nachweis des Paar-Regel Gens eve starke Defekte in blas-
todermalen Stadien (Abb. 19, E-H). Die embryonale Anlage ist deutlich verkleinert,
der der Anlage der Serosa im Wildtyp entsprechende Bereich, ist in der Folge flä-
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