Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...
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I. 2. Ergebnisse<br />
Expression auf die anteriore Hälfte des Embryos zurück. Es ist natürlich möglich, und<br />
vor allem im Hinblick auf die verhältnismäßig schwachen anterioren nos/pum-<br />
Phänotypen interessant, dass eine subtile Veränderung des lokal begrenzten OTD-1-<br />
Proteingradienten in der Mitte des Blastoderms oder temporale Abweichungen der<br />
OTD-1-Regulation zum Phänotyp nach nos/pum-RNAi beitragen. Solche schwachen<br />
Veränderungen der OTD-1-Expression konnten wegen der dynamischen Entwicklung<br />
der Expression durch die hier verwendetetn Methoden wahrscheinlich nicht detektiert<br />
werden.<br />
Allerdings sind in deutlich späteren Stadien Veränderungen des OTD-1-Musters<br />
zu beobachten. Im wachsenden Keimstreif wird OTD-1 in einer schmalen Reihe von<br />
Mittellinienzellen exprimiert (Abb. 16, C). Im Wildtyp überschreitet die Breite dieses<br />
antero-posterioren Streifens nie drei nebeneinander liegende Zellen (Abb. 16, C).<br />
Nach pumilio- oder nos/pum-RNAi allerdings, umfasst der Streifen etwa doppelt so<br />
viele Zellen (Abb. 16 D, E). Es kommt also zu einer Missexpression von OTD-1.<br />
Obwohl vollkommen unklar ist, ob diese Regulation direkt von NOS/PUM abhängt,<br />
bietet dieser Befund zumindest eine mögliche Erklärung für das Vorhandensein des<br />
NREs im 3’ UTR der otd-1-mRNA. Die Verbreiterung der Mittelliniendomäne ist nach<br />
pumilio- und nos/pum-RNAi, nicht aber nach nanos-RNAi beobachtbar (Abb. 16, D,<br />
E, bzw. nicht gezeigt). Entweder ist dies also eine nanos-unabhängige Funktion des<br />
PUMILIO-Proteins, oder dieser Prozess zeigt sich als nicht ausreichend sensibel für<br />
die Transkriptreduktion durch nanos-RNAi und verhindert somit die Ausprägung des<br />
Phänotyps.<br />
Eine vergleichbare Analyse der HUNCHBACK-Protein-Expression konnte leider<br />
nicht durchgeführt werden, da der von Wolff et al. (1995) verwendete Antikörper<br />
gegen das HB-Protein nicht mehr verfügbar ist. Wolff et al. konnten zeigen, dass die<br />
HB-Expression am posterioren Pol des frühen Blastoderms offenbar translationell<br />
reprimiert wird, während die maternale hb-mRNA noch ubiquitär vorhanden ist (Wolff<br />
et al., 1995). Auch in diesem Fall wurden NANOS und PUMILIO als mögliche Re-<br />
pressoren vorgeschlagen. Meine Analyse der mRNA-Expression zeigte keine<br />
feststellbaren Veränderungen in nos/pum-RRNAi-Embryonen, die möglicherweise<br />
einen Hinweis auf Veränderungen der Proteinexpression hätte liefern können (nicht<br />
gezeigt).<br />
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