Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...
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I. 2. Ergebnisse<br />
2.4.3. nanos und pumilio sind nötig für die Expression eines termina-<br />
66<br />
len Zielgens<br />
Im vorangegangenen Kapitel habe ich gezeigt, dass nanos und pumilio Einfluss<br />
auf posteriore gap-Domänen und die posteriore Invagination des Keimrudiments<br />
haben, und auf eine Ähnlichkeit zu Effekten nach RNAi gegen Komponenten des<br />
torso-Signalwegs hingewiesen (Schoppmeier und Schröder, 2005). Ein Zusammen-<br />
hang zwischen diesen Systemen und nanos/pumilio ist also denkbar. Um dies zu<br />
überprüfen habe ich die Auswirkungen von nos/pum-RNAi auf die Expression eines<br />
Zielgens des terminalen Systems, nämlich tailless, untersucht. In Drosophila wird die<br />
Expression von tailless am posterioren Pol des Embryos durch die Aktivierung des<br />
torso-Rezeptors ermöglicht (Furriols und Casanova, 2003). Auch im Tribolium-<br />
Blastoderm wird tll am posterioren Pol exprimiert (Schröder et al., 2000). Kurz bevor<br />
die Differenzierung des Blastoderms in Serosa- und Embryonalanlage anhand der<br />
Kernmorphologie sichtbar wird, ist tll in einer Kappe am posterioren Ende des Emb-<br />
ryos exprimiert. Eine anteriore Expressionsdomäne entsteht erst in der Kopfanlage<br />
des differenzierten Blastoderms. Zu diesem Zeitpunkt existieren beide Domänen für<br />
eine sehr kurze Zeit gleichzeitig, bis die bereits deutlich reduzierte posteriore Domä-<br />
ne vollständig verschwindet. Die posteriore tll-Domäne ist also nur innerhalb eines<br />
kurzen Zeitfensters vorhanden (Schröder et al., 2000). Während diese transiente<br />
Expression sowohl in lateraler Ansicht, als auch in posteriorer Aufsicht eines Wildtyp<br />
Embryos (Abb. 14, E, I) deutlich zu erkennen ist, fehlt sie nach nos/pum-RNAi nahe-<br />
zu vollständig (Abb. 14, F, J). Die Verteilung der Zellkerne in Hoechst-Färbungen<br />
(Abb. 14, G, H) zeigt, dass hier nur sich entsprechende Entwicklungsstadien mitein-<br />
ander verglichen wurden. In beiden hier gezeigten Embryonen ist noch keine<br />
Ungleichverteilung der Zellkerne zu erkennen, wobei beide die gleiche Zellkerndichte<br />
aufweisen. Als Kontrolle wurde in diesem Experiment zusätzlich die Expression von<br />
otd-1 nachgewiesen. otd-1 ist zu diesem Entwicklungsstadium in einer großen,<br />
anterioren Domäne exprimiert, die nicht mit der posterioren tll-Expression überlappt<br />
(Abb. 14, E, F). Das Vorhandensein der otd-1-Domäne schließt ein Fehlen der tll-<br />
Expression aufgrund von RNA-Degradation wegen mangelnder Fixierung oder<br />
anderer Probleme der Nachweismethode aus und dient als zusätzlicher Hinweis auf<br />
das vergleichbare Entwicklungsalter der Embryonen.<br />
nanos und pumilio sind also nötig für die Expression des terminalen Zielgens tll.<br />
Somit eröffnet sich die Möglichkeit, dass nanos und pumilio über die Regulation