Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...
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I. 2. Ergebnisse<br />
2.4. Frühembryonale Defekte führen zu einem vorzeitigen Ab-<br />
bruch der Segmentierung in nanos/pumilio-RNAi-Embryonen<br />
Die bereits erläuterten morphologischen Defekte der larvalen Kutikula nach na-<br />
nos- und pumilio-RNAi könnten auf zwei unterschiedliche Arten während der Embry-<br />
onalentwicklung hervorgerufen werden. Entweder sie sind das Produkt von Fehlern<br />
während der Segmentbildung, also im Laufe der embryonalen Musterbildung, oder<br />
sie entstehen in der Folge irregulärer Prozesse während der nachfolgenden Gewe-<br />
bedifferenzierung. Zwischen diesen Alternativen kann durch die morphologische<br />
Analyse embryonaler Stadien unterschiedlichen Alters, bzw. durch die Anwendung<br />
molekularer Marker mit informativen Expressionsmustern unterschieden werden.<br />
2.4.1. Die Segmentbildung aus der Wachstumszone ist gestört<br />
Zur Analyse der frühen Segmentbildung eignet sich die Expression des Segment-<br />
Polaritäts-Gens wingless. Das Expressionsmuster von wingless scheint innerhalb der<br />
Insekten hoch konserviert zu sein (Peel et al., 2005). In Drosophila bilden die anein-<br />
ander angrenzenden Domänen von wingless und engrailed Kompartmentsgrenzen,<br />
sie definieren die Parasegmente (Martinez-Arias et al., 1988). In Tribolium wird wg<br />
zunächst in zwei okularen und einer posterioren Domäne im Blastoderm exprimiert<br />
(Nagy und Carroll, 1994). Im Laufe der Keimstreifstreckung werden paarige segmen-<br />
tale Streifen in antero-posteriorer Progression gebildet und ebenfalls paarige Domä-<br />
nen in unterschiedlichen Bereichen des anterioren Kopfes angelegt. Die bereits im<br />
Blastoderm sichtbare posteriore Domäne in der Wachstumszone wird aufrechterhal-<br />
ten und die endet schließlich in der Proktodeumsanlage (Abb. 13, A; Nagy und<br />
Carroll, 1994). Die segmentalen Streifen bleiben auch während der weiteren Diffe-<br />
renzierung des Embryos erhalten und lassen somit auch zu späteren Zeitpunkten<br />
noch Rückschlüsse auf die Segmentbildung zu. Das Alter der Embryonen kann<br />
anhand der Entwicklung der Beinanlagen und der gnathalen Extremitäten sowie der<br />
wg-Expression im Kopf gut abgeschätzt werden.<br />
In nos/pum-RNAi Embryonen sind segmentale wg-Domänen zwar nachweisbar,<br />
sie zeigen aber Veränderungen der aus der Wachstumszone hervorgehenden Seg-<br />
mente an (Abb. 13, B). Zum einen wird deutlich, dass nicht alle abdominalen wg-<br />
Domänen gebildet werden, zum anderen zeigen die vorhandenenen wg-Streifen<br />
irreguläre Muster. Meist sind die anterioren ein bis drei wg-Domänen im abdominalen<br />
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