Dokument 1.pdf - OPUS - Friedrich-Alexander-Universität Erlangen ...
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I. 2. Ergebnisse<br />
2.3.2. Defekte nach pumilio pRNAi<br />
52<br />
Zur Analyse der pumilio-Funktion wurde dsRNA eines 887 bp Fragments, das die<br />
konservierte Puf-Domäne überspannt, in weibliche Puppen injiziert und deren Nach-<br />
kommen analysiert.<br />
Die durch pum-RNAi hervorgerufenen Defekte (Abb. 9) sind den nanos Phänoty-<br />
pen im Wesentlichen identisch. Wiederum ist der auffälligste Effekt eine Reduktion<br />
der abdominalen Segmente auf vier bis sieben (s. Anhang, Abb. 41, Tab. 12), die in<br />
aller Regel unterschiedliche Defekte aufweisen, wie sie schon oben für nanos be-<br />
schrieben wurden. Auch nach pumilio-RNAi finden sich Veränderungen der Kopf-<br />
segmente (Abb. 10, C). Es treten ebenfalls Transformationen auf, wobei hier die<br />
Mandibeln von unvollständigen Transformationen betroffen sind. Diese werden zu<br />
einer anderen gnathalen Identität transformiert, was durch das Auftreten von Arealen<br />
sensorischer Organe auf der Mandibel deutlich wird (Abb. 10, C). Solche Areale<br />
finden sich normalerweise an den distalen Enden der Palpen von maxillären oder<br />
auch labialen Segmenten. Zusätzlich zu diesen Effekten zeigen pum-RNAi Larven<br />
auch Verkürzungen aller segmentalen Extremitäten (Abb. 9, Pfeilspitze in C; Abb.<br />
22). Auf diesen pumilio-spezifischen Phänotyp werde ich später nochmals zurück-<br />
kommen (s. 2.8.3). Erwähnt sei allerdings, dass sich die Ausbildung der segmentalen<br />
Gliedmaßen, ebenso wie die Bildung der abdominalen Segmente, sehr sensitiv<br />
gegenüber dem RNAi-Effekt zeigt. Beide Effekte treten gemeinsam, also mit gleicher<br />
Häufigkeit auf (nicht gezeigt). Im Falle der pumilio-RNAi bedeutet das: im weitaus<br />
größten Teil der Nachkommen (81,5 %, s. Anhang Tab. 10). Auch nach pum-RNAi<br />
wird klar, dass Kopfsegmente weniger häufig betroffen sind und somit eine Kombina-<br />
tion aus Kopf- und abdominalen Defekten den stärksten Phänotyp darstellt.<br />
Die nahezu identischen Effekte nach nanos- oder pumilio-RNA-Interferenz legen<br />
nahe, dass beide Proteine wie in Drosophila auch in Tribolium in einem Komplex<br />
wirken. Die Penetranz beider RNAi-Phänotypen differiert allerdings. Während pumi-<br />
lio-RNAi bei 81,5 % der entwickelten Larven zu Defekten führt, ist das nach nanos-<br />
RNAi nur bei 51,4 % der Fall (s. Anhang, Tab. 10). pumilio-RNAi scheint also effekti-<br />
ver zu spezifischen Phänotypen zu führen als nanos-RNAi. In beiden Experimenen<br />
zeigt sich außerdem, dass abdominale Defekte deutlich häufiger sind als das Auftre-<br />
ten gnathaler Veränderungen. Die Bildung abdominaler Segmente reagiert demnach<br />
sensitiver auf die Reduktion der mRNA-Niveaus beider Gene als die Musterbildung