Acrobat Distiller, Job 4 - Universität Tübingen

Posterführung
Poster 4
Samstag 17:45 – 18:30
Elektrophysiologische Evaluation der Sehfunktion bei der RPE65-
KO-Maus
A. Huth, M. W. Seeliger
Universitätsaugenklinik Abteilung II, Labor für retinale Funktionsdiagnostik, Schleichstr. 12-16,
72076 Tübingen
Bei der Erforschung der molekulargenetischen und pathophysiologischen Grundlagen erblicher
Netzhauterkrankungen spielen Tiermodelle (v.a. Maus) eine wichtige Rolle. Neben dem Wert für
das Verständnis eines Krankheitsbildes haben knock-out Mäuse aber oft auch spezifische Defekte
der Sehfunktion, die zur Aufklärung der normalen Netzhautphysiologie dienen können.
Beispielsweise haben Rho -/- -Mäuse kein Rhodopsin und daher keine Stäbchenfunktion, während
CNG3 -/- -Mäuse durch den Wegfall des CNG3-Kanals der Zapfen keine Zapfenfunktion haben. Es
erlaubt zudem mittels Kreuzung die Generierung von Doppel-knock-outs zur Trennung von stäbchen-
und zapfenvermittelten Antworten bei Krankheitsmodellen mit unklarer Pathophysiologie.
Beispielhaft sei hier die Leber'sche Congenitale Amaurose (LCA) genannt, bei der es durch Mutation
im RPE65-Gen zu einer der schwerwiegendsten Netzhauterkrankungen mit frühzeitiger Erblindung
im Kindesalter kommt. Das RPE65-Gen kodiert ein Protein, welches essentiell für die
Regeneration des Sehpigments im retinalen Pigmentepithel ist; Mutationen desselben sind nach
bisherigen Erkenntnissen für 10-15% der LCA-Fälle verantwortlich. Aufgrund der Beobachtung,
dass an LCA erkrankte Patienten an einer Netzhautdegeneration mit Nachtblindheit leiden und
lediglich unter optimalen Belichtungsverhältnissen ein Restsehvermögen aufweisen, vermutete
man eine Stäbchenfunktionsstörung mit erhaltener Restfunktion der Zapfen.
Bei der Untersuchung von RPE65-KO-Mäusen ergab sich jedoch die Vermutung, dass die verbliebenen
lichtevozierten Netzhautantworten von den Stäbchen herrühren könnten. Durch Züchtung
von Doppel-knock-out-Mäusen (Kreuzung der RPE65-Mutante mit Rho -/- bzw. CNG3 -/- KO-
Mäusen zur Separierung der Zapfen- bzw. Stäbchenfunktion respektive) konnten wir durch eine
genaue Differenzierung zwischen den beiden Rezeptorsystemen diese Hypothese untersuchen. Es
zeigte sich, dass die Elektroretinogramme (ERGs) der RPE65 -/- und RPE65 -/- CNG3 -/- -Mäuse nahezu
identisch waren, während von RPE65 -/- Rho -/- -Mäusen keine detektierbaren Antworten abgeleitet
werden konnten. Damit war gezeigt, dass die Sehfunktion bei der LCA ausschließlich von den
Stäbchen getragen wird
Dieser Nachweis ist eminent wichtig für die Planung und Anwendung von Therapieversuchen.
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