Experimentelle Mikrobiologie und Genetik - ISB - Bayern
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44 Kommentierte Versuchsanleitungen <strong>und</strong> Kopiervorlagen<br />
Beobachtung: Farbe der Lösungen:<br />
Edukt DNA-<br />
Hydrolysat<br />
RNA-<br />
Hydrolysat<br />
Desoxyribose<br />
Ribose Wasser<br />
Dische-R. blau farblos dunkelblau farblos farblos<br />
Orcin-R. gelb grün gelb grün gelb<br />
Deutung: Das DNA-Hydrolysat enthält den DNA-Baustein Desoxyribose, das RNA-<br />
Hydrolysat den RNA-Baustein Ribose.<br />
Hintergr<strong>und</strong>: • Desoxyribose-Nachweis:<br />
Durch Säureeinwirkung entsteht aus Desoxyribose in nicht exakt geklärtem<br />
Mechanismus unter Wasserabspaltung ω-Hydroxylävulinaldehyd<br />
(4-Keto-5-hydroxypentanal). Der Aldehyd reagiert mit<br />
Diphenylamin zu sechs chromatographisch trennbaren Produkten, von<br />
denen eines im sauren Milieu blau gefärbt ist.<br />
• Ribose-Nachweis:<br />
Ribose bildet im Sauren unter Wasserabspaltung Furfural (Furan-2aldehyd),<br />
das mit Orcin unter der Bildung eines grünen Farbstoffs reagiert.<br />
Entsorgung: als organische Abfälle<br />
Quelle: veränd. nach Wenck & Kruska (1988): <strong>Experimentelle</strong> Chemie der Nukleinsäuren.<br />
Aulis Verlag Deubner & Co, Köln<br />
Hinweise: Die Orcin-Reaktion ist eigentlich nicht spezifisch für Ribose. Auch Desoxyribose<br />
ergibt einen grünen Farbstoff, allerdings nur mit 20 % der<br />
Extinktion bei gleicher Konzentration wie Ribose. Für qualitative Bestimmungen<br />
ist die Reaktion trotzdem einsetzbar, da nach 10 min DNA-<br />
Hydrolyse bzw. bei so kurzer Reaktionszeit (2 min) keine sichtbare Veränderung<br />
auftritt.